產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4215 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Porcine paramyxovirusRTPCR | BKP4215 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one 85175-59-3 中文名: 分子式:C15H18ClNO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2''-O-Acetylsprengerinin C 1220707-33-4 中文名: 分子式:C46H72O17 度:% 關(guān)鍵詞: 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子-1(mouse SDF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 152628-02-9 中文名: 分子式:C19H20N4 度:98.0% 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 15873-25-3 中文名:2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯 分子式:C26H21NO3 度:98.0% 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子-1R(mouse SDF-1R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Phenformin 834-28-6 中文名:鹽酸苯乙雙胍 分子式:C10H16ClN5
空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Trazodone 25332-39-2 中文名:鹽酸曲唑酮 分子式:C19H23Cl2N5O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
可溶性內(nèi)皮細胞蛋白 C 受體 (sEPCR) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 中文名: 分子式:C28H44O3
可溶性內(nèi)皮生長因子受體1 英文名稱: Human Soluble Fms-like Tyrosine Kinase 1/sVEGFR1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SFLT1 Paroxetine 78246-49-8 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3
可溶性內(nèi)皮生長因子受體1 英文名稱: Human soluble Fms.liketyrosinekinase Receptor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sFLt-1 Paroxetine 78246-49-8 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3 度:99.0%
豬副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性綠 50 質(zhì)量規(guī)格:BS,進口原裝Lissamine™ Green B
軟骨細胞培養(yǎng)基CM酸性綠A質(zhì)量規(guī)格:BS,>97%,進口分裝Acid Green A
C-33A細胞,人子細胞 兔主動脈平滑肌細胞,CCC-SMC-1細胞 人表皮角質(zhì)細胞-胎兒HEK-f焦1酸鉀(>97%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>97%,BCPotassium pyrophosphate, tetrabasic
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2鎢酸鉀二水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPotassium tungstate, dehydrate
hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人類外周血CD14+單核細胞團塊單一來源,預(yù)選型 > 1 mio.cells 人脊髓星形膠質(zhì)細胞RNAHA-sp miRNA5 μg硫酸奎寧水合物(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRQuinine hemisulfate salt hydrate
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5TES;Tris乙磺酸,2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,ARTES
中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細胞瘤細胞,P815細胞 INS-1細胞,大鼠胰島素細胞3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTAPSO mono
293來源病毒包裝細胞;ΦA-GPTAPSO;3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRTAPSO
STIM1 Others Human 人 STIM1 / GOK 人細胞裂解液 (陽性對照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRTAPS Salt
神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)S-I-G-S-L-A-K質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRS-I-G-S-L-A-K
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。