產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4221 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬輪狀病毒群PCR檢測試劑盒直銷 | Porcine rotavirus group AARTPCR | BKP4221 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬輪狀病毒群PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride 2421-28-5 中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐 分子式:C17H6O7 神經(jīng)營養(yǎng)素3 英文名稱: Neuroophin-3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: -3
1,2-Benzisothiazolin-3-one 2634-33-5 中文名:1,2-苯并異噻唑-3-酮 分子式:C7H5NOS 上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benzoin methyl ether 3524-62-7 中文名:安息香甲基醚 分子式:C15H14O2 神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benzanthrone 1982/5/3 中文名:苯并蒽酮 分子式:C17H10O 熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-(+)-Arginine 74-79-3 中文名:L-(+)-精氨酸 分子式:C6H14N4O2 腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錳快速測試盒 Manganese rapid test case Ranitidine 中文名:雷尼替丁 分子式:C13H22N4O3S
錳過氧化物酶(MnP)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Prasugrel 中文名:普拉格雷 分子式:C20H20FNO3S
錳測試盒 Manganese test case 4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide 119018-29-0 中文名: 分子式:C16H21N3O4S
霉素檢測試紙條(液態(tài)樣品) Chloramphenicol detection test sip (liquid sample) Pidotimod 121808-62-6 中文名:匹多莫德 分子式:C9H12N2O4S
霉(AFT)ELISAKit ELISA. 96T/48T Triptoquinone A 142950-86-5 中文名: 分子式:C20H24O4
豬輪狀病毒群PCR檢測試劑盒直銷TGFBR1 Others Human 人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瑞香素/祖師麻甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Daphnetin
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12三氯蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sucralose
心房成纖維細(xì)胞 (HCFaa)( 5×105 )三七皂甙R1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Notoginsenoside R1
CM-M121小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Trifolirhizin
野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d 小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL日當(dāng)藥黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Swertiajaponin
CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-高本酸shēng huà shì jì容量:RT5克
小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP阿苷 Uracil 1-β-D-arabinofuranoside 3083-77-0 100MG 通用試劑
SK-BR-3細(xì)胞,腺癌細(xì)胞 人細(xì)胞,TE-1細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1六拂炳1;全拂炳1 Hqxcfluoropropqnq;Hqxcfluoropropylqnq;Pqrfluoropropqnq 116-12-4
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4Semicarbazidexy7nochloride鹽酸脲100克實習(xí)級,98%
CPE Others Human 人 CPE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 104-88-14-錄;對錄4-Chloro