產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4259 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
兔粘液瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Rabbit Myxomatosis Virus(RMV)PCR | BKP4259 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:兔粘液瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
3-Hydroxychimaphilin 33253-99-5 中文名:3-羥基梅笠草素 分子式:C12H10O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗菌; ; 萘醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-Hydroxycatalponol 265644-24-4 中文名: 分子式:C15H18O3 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2 度:90.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one 766-36-9 中文名: 分子式:C7H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2 度:93.0% 小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人乙脫氫酶elisa試劑盒 人乙脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人乙脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人乙脫氫酶試劑盒、人乙脫氫酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 154057-56-4 中文名: 分子式:C19H15BrFN
人胰島素原(PI)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tiamulin 55297-95-5 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S 度:98.0%
人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tiamulin 55297-95-5 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S
人氧化抗體(OLAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T Timosaponin AIII 41059-79-4 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13
人血小板生成素(TPO)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit 2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 15873-25-3 中文名:2-萘基N-苯甲?;奖彼狨?/span> 分子式:C26H21NO3
兔粘液瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)SERPIND1 Others Mouse 小鼠 SerpinD1 / HCII 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 延胡索酸/富馬酸/ 反丁1二酸質(zhì)量規(guī)格:AR,99%Fumaric acid
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24甲磺酸達(dá)氟沙星質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDanofloxacin mesylate
PTPN12 Others Human 人 PTPN12 (aa 1-355) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲磺酸達(dá)氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Danofloxacin mesylate
海馬神經(jīng)應(yīng)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)海藻酸鈣質(zhì)量規(guī)格:AR,99%Calcium Alginate
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪 人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞,SJCRH30[RC13;RMS 13;SJRH30]細(xì)胞 MFC(細(xì)胞)脫氫非洛地平質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Dehydro Felodipine
IL21R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 丁二酸鈉250毫克
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7對(duì)-N-乙酰-β... 4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosamin... 3459-18-5 100MG 通用試劑
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4 胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液) 1mL健那綠B Jcnus Grqqn B 869-83-
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse本甲酰三扶1克RT
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4196-99-0比布列西猩紅ACID RED 66
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。