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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4277 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | RhinovirusRTPCR | BKP4277 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪 分子式：C30H22N2O2 口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式：C28H18N2O2 鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
4-(Phenylthio)benzyl alcohol 中文名： 分子式：C13H12OS 鴨特定基因序列(Duck)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名： 分子式：C12H15N3O 鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 中文名： 分子式：C16H18FN3O3S 鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit 2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名： 分子式：C16H15NO3
人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit 2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名： 分子式：C16H15NO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
人周期素依賴性激酶8(CDK8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK8 (Cyclin Depende Kinase 8) ELISA Kit 2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 中文名： 分子式：C26H52O3 度：98.0%
人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名： 分子式：C14H12O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 虎杖; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人周期素依賴性激酶6(CDK6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human CDK6 (Cyclin Depende Kinase 6) ELISA Kit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid 104239-97-6 中文名： 分子式：C19H28INO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 磺胺二甲嘧啶質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRSulfamethazine
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3磺胺二甲嘧啶 （標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulfamethazine
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 糖精（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：校準(zhǔn)溫度計(jì)用Saccharin
Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞酚酞（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測(cè)定Phenolphthalein
NEI-H209細(xì)胞，小細(xì)胞細(xì)胞 人細(xì)胞,22RV1細(xì)胞 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg磺胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Sulfanilamide
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-鹽酸半胱酸，英文名或英文縮寫：L-Cysteine metxyl ester xy7nochloride，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克
CM-R082大鼠骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL加醋芐酯;蟻醋芐酯 Bqnzyl forMctq;ForMic ccid bqnzyl qstqr; 104-27-4
BSG823細(xì)胞，人細(xì)胞 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞,SK-N-SH細(xì)胞 瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-100 Medium 9050-94-6 25G 分離試劑
CNE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2ABTSdiammoniumsalt2,2'-連氮基-雙-(3-乙基本并二氫噻唑啉-6-磺酸)二鹽5克超，98%
FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (順二酸鈉(馬來酸鈉))
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
