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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：羌蟲(chóng)病立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide  119018-29-0  中文名：  分子式：C16H21N3O4S    RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴(lài)性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Minoxidil  38304-91-5  中文名：米諾地爾  分子式：C9H15N5O    CLIAKitforATGA/TGABELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體規(guī)格：48T/96T

Monobenzone  103-16-2  中文名：莫諾苯宗  分子式：C13H12O2    線(xiàn)粒體復(fù)合物IV蛋白共沉淀分析試劑盒5次

Nitrendipine  39562-70-4  中文名：尼群地平  分子式：C18H20N2O6    Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  105889-80-3  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2    豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1 ELISA Kit
人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S 

人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4 

人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4
羌蟲(chóng)病立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒直銷(xiāo)R9[PR9]小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 R9[PR9] mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+5uM 吉非替尼利福平；利發(fā)霉素質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Rifampicin

IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白利福平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Rifampicin

SW 780(人膀胱移行細(xì)胞癌) 5×106cells/瓶×2 5637(人細(xì)胞)泮托拉唑鈉1.5水合物質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPantoprazole Sesquihydrate

CM-M099小鼠表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品Pantoprazole Sesquihydrate

IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (S)-10-羥基喜樹(shù)堿;10-羥基喜樹(shù)堿質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR(s)-10-hydroxycamptothecin
NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2白當(dāng)歸素(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Byakangelicin

C-33 A(人子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30白果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品(?)-Bilobalide

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1白花前胡醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Peucedanol

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 環(huán)杷明;環(huán)巴胺;去氧芥芬胺(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品;Hh信號(hào)通路拮抗劑,作用于SmoCyclopamine

人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奧昔布寧N氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Oxybutynin N-Oxide
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。