產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4295 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
輪狀病毒群PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Rotavirus A ARTPCR | BKP4295 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:輪狀病毒群PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
4-Aminobutyric acid 1956/12/2 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2 細菌茁糖酵解酚紅瓊脂平板50個
Gliquidone 33342-05-1 中文名:格列喹酮 分子式:C27H33N3O6S rabbitEndostatin,ESELISAKit兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Lansoprazole 103577-45-3 中文名:蘭索拉唑 分子式:C16H14F3N3O2S 豚鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 ,英文名: CRP ELISA Kit
Gliclazide 21187-98-4 中文名:格列齊特 分子式:C15H21N3O3S Human hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 人肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒
Carvedilol 72956-09-3 中文名:卡維地洛 分子式:C24H26N2O4 rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒 Lactate dehydrogenase (LDH) test kit 3-Acetylcoumarin 中文名:3-乙?;愣顾?/span> 分子式:C11H8O3 度:99.0%
乳酸(LD)測試盒(測血清、組織等) Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.) 3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione 55604-88-1 中文名: 分子式:C8H8O4
乳酸(LD)測試盒(測全血) Lactic acid (LD) test case (whole blood) 3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione 55604-88-1 中文名: 分子式:C8H8O4 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
乳酸(LD)(血清、組織)檢測 Lactic acid (LD) (whole blood) detection 3-Acetylcoumarin 3949-36-8 中文名:3-乙?;愣顾?/span> 分子式:C11H8O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
乳酸(LD)(全血)檢測 Lactate dehydrogenase (LDH) detection 3-Acetylcoumarin 3949-36-8 中文名:3-乙?;愣顾?/span> 分子式:C11H8O3
輪狀病毒群PCR檢測試劑盒供應(yīng)PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人細胞裂解液 (陽性對照) MK-2866質(zhì)量規(guī)格:>99%Ostarine,GTx-024
人成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLXTT鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>90%,進分XTT salt
PA317細胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞 小腸耶爾森氏菌 豚鼠肺細胞;GP-F1二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone
CCL17 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 (His 標簽)二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone
NG108-15(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)之融合細胞) 5×106cells/瓶×2 人 FAM20B / Gxk1 人細胞裂解液 (陽性對照) 乳清酸質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BROrotic acid
THC-8307細胞,人高分化腺癌細胞系 人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細胞,OCM-1A細胞 綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFPACRYL/BIS29:1酰胺/甲叉 29:1, 40%溶液超級透明,無色溶液COLDsigma
HIC(人小細胞) 5×106cells/瓶×25--2-脫氧尿苷 5-Iodo-2′-deoxyuridine,≥99% 54-42-2 1G 通用試劑
ACE2 Others Human 人 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-基-1,2-環(huán)己二羧臘酐 Hqxcxy7no-4-mqthylphthclic cnhydridq 19438-60-9
人口腔角質(zhì)細胞HOKTRISTRIS超級白色結(jié)晶粉末至針狀晶體RTsigma
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/England/195/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照) 對錄本4-CHLOROMERCURIBENZOIC ACID
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。