產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4302 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書 | Salmonella abortus equiPCR | BKP4302 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:馬沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
4-Benzyloxyindole 20289-26-3 中文名:4-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0% 小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate 3479-47-8 中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂 分子式:C19H19NO6 度:98.0% 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 7536-58-5 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C16H21NO6 度:98.0% 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Benzyl L-aspartate 2177-63-1 中文名:L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C11H13NO4 度:98.0% 小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3 度:98.0% 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體elisa試劑盒 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗促甲狀腺素受體抗體試劑盒、小鼠抗促甲狀腺素受體抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 4568-71-2 中文名:3-芐基-5-(2-羥乙基)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS 度:98.0%
山羊雌三醇(E3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 928165-59-7 中文名: 分子式:C17H25ClO
山羊雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 中文名:3-芐基-5-(2-羥乙基)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS 度:98.0%
山羊白介素4elisa試劑盒 山羊白介素4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊白介素4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊白介素4試劑盒、山羊白介素4 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 中文名: 分子式:C12H12F2O4 度:98.0%
山羊白介素4(IL-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-Benzoylthiazolidine-2-thione 中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮 分子式:C10H9NOS2 度:98.0%
馬沙門氏菌PCR檢測試劑盒說明書PNLIPRP1 Others Human 人 PNLIPRP1 / PLRP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (R)-布洛芬質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(R)-Ibuprofen
CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(S)-布洛芬質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(S)-Ibuprofen
BI U-87細(xì)胞,細(xì)胞 總T細(xì)胞,OKT3細(xì)胞 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1依那普利質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Enalapril
BRL(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21,3-二芐基-5-氟尿嘧啶質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil
CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 外消旋5-羧基托特羅定質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口rac 5-Carboxy Tolterodine
QGY-7703細(xì)胞,細(xì)胞 表皮癌細(xì)胞系,A431細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076PBSBUFFERWITH0.05%TWEEN20,pH7.4PBS溶液含0.05% 吐溫20蛋白組學(xué)級白色顆粒粉末RTsigma
小鼠樹突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP甜菜減;甘安醋三安內(nèi)鹽;三銨內(nèi)鹽 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7
CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲基紅 Methyl Red (pH indicator, pH 4.4 to 6.0) 493-52-7 5G 染色劑
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞裂解物HBdSFL葡甲,英文名或英文縮寫:Meglumine,級別:高,98%,規(guī)格:5毫克
VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-Serine 25g/100g/250g/500g 國產(chǎn)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。