產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4342 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
血吸蟲通用PCR檢測試劑盒說明書 | Schistosoma spp.PCR | BKP4342 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:血吸蟲通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
5-Hydroxymethyl-2-furoic acid 中文名:5-羥甲基-2-糠酸 分子式:C6H6O4 細胞間粘附分子1 英文名稱: Human Iercellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ICAM-1
5-Formyl-2-furylboronic acid 中文名: 分子式:C5H5BO4 干擾素α受體 英文名稱: Human Ierferon α Receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IFNαR
5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole 中文名: 分子式:C7H9N3O3 樣生長因子結合蛋白-1 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP-1
5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2 樣生長因子結合蛋白-2 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP-2
5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 樣生長因子結合蛋白-3 英文名稱: insulin-like growth factors binding protein-3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP-3
兔促卵泡素(rabbit FSH) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C18H27N3O4 度:98.0%
兔雌二醇(rabbi E2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-Amino-1-naphthol 中文名:5-氨基-1-萘酚 分子式:C10H9NO 度:98.0%
兔超氧化物歧化酶 英文名稱: Rabbit Superoxide Dismase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SOD 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS
兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde 中文名: 分子式:C8H6F2O3
兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine 中文名: 分子式:C16H14ClNO
血吸蟲通用PCR檢測試劑盒說明書NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha Protein (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 拉呋替?。藴势罚┵|量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Lafutidine
人肺動脈成纖維細胞RNAHPAF miRNA5 μg托可索侖/維生素E聚乙二醇琥珀酸酯質量規(guī)格:VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherolTocofersolan,VE-TPGS
兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE) 細胞,HCT 116細胞 M-1細胞,小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)鹽酸甲氧那明質量規(guī)格:>98.5%,CPMethoxyphenamine HCl
人胚肺細胞系;KuMA安倍生坦質量規(guī)格:>98%Ambrisentan
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 安倍生坦(標準品)質量規(guī)格:>98%,標準品Ambrisentan
HeLa 229 人細胞5-FAM, SE;5-羧基熒光素琥珀酯質量規(guī)格:0.95-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester
EA.hy926人臍細胞融合細胞 EA.hy926 human umbilical vein cell fusion cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS5,6-FAM;5(6)-羧基熒光素質量規(guī)格:0.955(6)-Carboxyfluorescein
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標簽)5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酯質量規(guī)格:>90%5(6)-FAM, SE
大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106) C6, 大鼠腦細胞 RattusS-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷甲硫氨酸質量規(guī)格:BR,度>96%,干品腺苷蛋氨酸>49%S-adenosyl-L-mine (SAM)
人羊膜細胞;WISH5(6)-ROX ;5(6)-羧基-X-羅丹明鹽酸鹽質量規(guī)格:>95%,進分5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。