產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4245 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒直銷 | Providencia rettgeriPCR | BKP4245 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3-Amino-5-phenylpyrazole 中文名:3-氨基-5-苯基吡唑 分子式:C9H9N3 度:98.0% 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Amino-3-phenyl-1-propanol 中文名:3-氨基-3-苯基-1-丙醇 分子式:C9H13NO 度:98.0% 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit ELISA. 96T/48T
DL-2-Amino-n-octanoic acid 中文名:DL-2-氨基正辛酸 分子式:C8H17NO2 度:98.0% 小鼠5核苷酸酶(5-)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Amoxapine 中文名:阿莫沙平 分子式:C17H16ClN3O 度:98.0% 小鼠促胰液素 英文名稱: Mouse Secretin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCT
6-Aminoquinoxaline 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 度:98.0% 小鼠分泌型IgA 英文名稱: Mouse secretory Immunoglobulin A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sIgA
人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Timosaponin AIII 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13
人抗鼠抗體(HAMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one 85175-59-3 中文名: 分子式:C15H18ClNO3
人抗鼠抗體(HAMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 中文名: 分子式:C11H13N3S 度:98.0%
人抗人類缺陷病毒抗體(HIV)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride 2421-28-5 中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐 分子式:C17H6O7
人抗繆勒管激素(AMH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human AMH (Ai-Mullerian Hormone) ELISA Kit 2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C26H52O3
雷氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒直銷SK-RC-42細(xì)胞,人細(xì)胞 鼠細(xì)胞系,MM45T.Li細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶琥珀酸甲潑尼龍(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Methylprednisolone hemisuccinate
HEL(人紅白細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2六甲蜜胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Altretamine
hMSC-UC-c 從臍帶基質(zhì)提取的的人類間質(zhì)干細(xì)胞(hMSC-UC) 500,000cells 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM甲氧氯普胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Metoclopramide
小鼠骨髓細(xì)胞;FDC-P1奧扎格雷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用Ozagrel
MERTK Others Mouse 小鼠 MERTK / MER 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Forskolin
Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml酰胺&甲叉雙酰胺溶液shēng huà shì jì容量:2~8℃1KU
人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNAHEK NA錄化膽減 Cholinq Chloridq 67-48-1
ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 咪唑 (常規(guī)) Imidazole (ACS reagent, ≥99%) 288-32-4 100G 通用試劑
KYSE30 人細(xì)胞TTC卵嶙脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃10克
CL-0320BC3H1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-Raffinose 10g/50g/100g/500g 原裝 Amresco J392