|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4254 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
同豬病毒1型偽病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Pseudorabies Virus(PrV，1)PCR | BKP4254 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：同豬病毒1型偽病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one 972-46-3 中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮 分子式：C21H30O2 度：98.0% 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名： 分子式：C13H16O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 162401-62-9 中文名： 分子式：C12H12F2O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 443882-99-3 中文名： 分子式：C13H9ClFNO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 928165-59-7 中文名： 分子式：C17H25ClO 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人纖維蛋白(FBL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 中文名：異綠原酸A 分子式：C25H24O12 度：98.0%
人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit 3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名：3,6-雙(羥甲基)杜烯 分子式：C12H18O2
人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒、人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 1521197-43-2 中文名： 分子式：C16H15ClN4O
人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名：2-氨基二苯硫醚 分子式：C12H11NS
人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Aminonicotinic acid 中文名：2-氨基煙酸 分子式：C6H6N2O2 度：98.0%
同豬病毒1型偽病毒PCR檢測試劑盒說明書SF767細(xì)胞，人細(xì)胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Methimazole Thio-β-D-glucuronide
RKO-E6(人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Mezlocillin
GBC-SD(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))5×106cells/瓶×2 盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3二去甲基米非司酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Didemethyl Mifepristone
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-122-羥基米非司酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口22-Hydroxy Mifepristone
16. 細(xì)胞系統(tǒng)甲基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml2,4-滴，英文名或英文縮寫：2,4-D，級別：高，99%，規(guī)格：25克
人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg貝那普利相關(guān)物質(zhì)A Bqnczqpril Rqlctqd CoMpound c;(3R)-3-[[(1R)-1-(qthoxyccrbonyl)-3-phqnylpropyl]cMino]-2,3,4,5-tqtrcxy7no-2-oxo-1H-1-bqnzczqpinq-1-ccqtic ccid, Monoxy7nochloridq 12447-89-2
MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 水溶性殼聚糖，英文名或英文縮寫：Chitosan，級別：高 ，98%，規(guī)格：25毫克
豬細(xì)胞;ST1-甲基-1H-咪唑，英文名或英文縮寫：1-metxylimidazole，級別：BR，99%，規(guī)格：1公斤
U251細(xì)胞，細(xì)胞 鼠成纖維細(xì)胞系,NIH/3T3細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7N-Acetyl-D-Glucosamine 10mg/100mg原裝 INALCO1758-0070
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
