產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4307 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
都柏林沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Salmonella dublinPCR | BKP4307 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:都柏林沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde 中文名: 分子式:C8H6F2O3 度:98.0% 維生素B2(VB2)檢測(cè) Detection of malic dehydrogenase
3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 中文名: 分子式:C12H12F2O4 度:98.0% 總基酸(T-AA)檢測(cè) Hydroxyproline sample preeatme
5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C7H4ClNO4 度:98.0% 維生素B2/核黃素 英文名稱: Human Vitamin B2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VB2
2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 度:98.0% 性因子裂解酶 英文名稱: von Willebrand factor-clea-ving protease 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: vWF-cp /ADAMTS13
Ethyl 2-(3-cyano-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-1,3-thiazole-5-carboxylate 中文名: 分子式:C14H12N2O3S 度:98.0% 氧化酶 英文名稱: Human Xahione oxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: XOD
神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營養(yǎng)因子 (GDNF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Nitrendipine 39562-70-4 中文名:尼群地平 分子式:C18H20N2O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
神經(jīng)激肽 A(Neurokinin A) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Testosterone isocaproate 15262-86-9 中文名:異己酸睪酮 分子式:C25H38O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
砷快速測(cè)定試劑盒 Arsenic rapid determination kit Rebeprazole 117976-90-6 中文名:雷貝拉唑鈉 分子式:C18H20N3NaO3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
蛇毒因子(CVF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Aminohippuric acid 中文名:4-氨基馬尿酸 分子式:C9H10N2O3
上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 3-Hydroxychimaphilin 33253-99-5 中文名:3-羥基梅笠草素 分子式:C12H10O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 抗菌; ; 萘醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
都柏林沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)PK(15)豬腎上皮細(xì)胞 PK (15) of porcine kidney epithelial cells MEM+10% FBS6-羧基四甲基羅丹明琥珀酯,6-TAMRA, SE質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標(biāo)記6-TAMRA, SE
IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His 標(biāo)簽)卵清蛋白;雞蛋白蛋白質(zhì)量規(guī)格:BR,80~90%Ovalbumin/Egg albumins
QGY-7703(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 7721(7721細(xì)胞)米替福新質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMiltefosine
CL-0212SK-Hep-1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Miltefosine
CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 6-硫鳥嘌呤質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR6-TG/Thioguanine
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)偶氮錄膦mN5克2~8℃
P3X63Ag8(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 啊錄米雙炳醋酯 clcloMqtcsonq Dipropionctq 66734-13-
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-131.2-環(huán)氧環(huán) Cyclohqxqnq oxidq 86-0-4
ADAM8 Others Cynomolgus 食蟹猴 ADAM8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 嶙酸氫二鉀shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
CL-0457TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(溴代十六烷基胺)