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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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乙型副傷寒沙門氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4319
  • 價格: ¥2499/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-16
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4319
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

乙型副傷寒沙門氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)

Salmonella paratyphi BPCR

BKP4319

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:乙型副傷寒沙門氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one   中文名:  分子式:C7H10ClNOS       英文名稱:   Mouse NO niic oxide   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NO

5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  中文名:  分子式:C19H18N2O3S    小鼠核轉(zhuǎn)錄因子   英文名稱:   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NF-κB

5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  中文名:  分子式:C26H17ClFN3O3    小鼠核因子-κB亞基ρ65親和肽   英文名稱:   Nuclear anscription Factor NF-Κb ρ65   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NF-Κb ρ65

5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名:  分子式:C22H25N3O2    小鼠神經(jīng)生長因子   英文名稱:    nerve growth factor    規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   NGF

5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  中文名:  分子式:C13H15N3O2    氧化酶(XOD)測試盒(比色法)
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  4-Amino-N-methylbenzamide  6274-22-2  中文名:4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式:C8H10N2O 

蘇木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye  4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  145783-14-8  中文名:  分子式:C7H7Cl2N3O2S 

松弛素-2   英文名稱:   Human Relaxin-2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   RLN-2  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  中文名:4,4'-(2-苯并惡唑基)  分子式:C28H18N2O2  度:98.0%

四硼酸   5kg  4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名:  分子式:C11H11NO2  度:98.0%

四甲基聯(lián)   5g  4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名:  分子式:C13H12OS  度:98.0%
乙型副傷寒沙門氏菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)PC-3人細(xì)胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培養(yǎng)基+10%FBS鹽酸苯海索(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Benzhexol hydrochloride

SCG2 Protein Human 重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標(biāo)簽)葉酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Folic acid

小鼠腹脊髓神經(jīng)細(xì)胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人細(xì)胞 Human葡萄糖酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Calcium gluconate

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163雙羥萘酸噻嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Pyrantel pamoate

VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCefazolin
CHL1 Others Human
CHL1 / CALL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酸性羅丹明B,英文名或英文縮寫:Lissamine rhodamine B,級別:BS,規(guī)格:1

人周細(xì)胞RNAHBVP miRNA5 μg頭孢坐林內(nèi) Cqfczolin 2923-19-9

PLA2G12B Others Mouse 小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-MINEL-(蛋酸)美國藥典級白色至米白色粉末COLDsigma

Kyse510 人細(xì)胞2-環(huán)己基乙磺酸,英文名或英文縮寫:CHES,級別:IND,規(guī)格:100

CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Agar,Bacterological 100g 日本分裝
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。


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