|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4347 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
塞皮克病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Sepik VirusRTPCR | BKP4347 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：塞皮克病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
5α-Androstanedione 中文名：5α-雄甾烷二酮 分子式：C19H28O2 錳過氧化物酶（MnP）測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
5α-Androstane-3β,17β-diol 中文名：5α-雄烷二醇 分子式：C19H32O2 雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
5-O-Ethylcleroindicin D 中文名： 分子式：C10H16O4 雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣
5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?；?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式：C37H35N3O7 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5 英文名稱： human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IGFBP5
5-Hydroxymethylfurfural 中文名：5-羥甲基糠醛 分子式：C6H6O3 胰島素 英文名稱： Human Insulin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： INS
兔固（ALD）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindazole 中文名：5-氨基吲唑 分子式：C7H7N3 度：98.0%
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Hydroxysapriparaquinone 120278-25-3 中文名： 分子式：C20H26O4 度：% 關(guān)鍵詞： 紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 81053-14-7 中文名： 分子式：C9H14O4 度：% 關(guān)鍵詞： 千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 154127-42-1 中文名： 分子式：C10H16N2O6S3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 中文名： 分子式：C11H7ClN4O2
塞皮克病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肌苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Inosine
角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基CEpiCM-prf5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR5'-AMP-Na2
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4 原髓細(xì)胞，HL-60細(xì)胞 Dami(巨核細(xì)胞細(xì)胞)滅菌唑(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.2%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.2% Triticonazole
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0901速滅威標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%Tsumacide solution
BAMBI Others Human 人 BAMBI / NMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 嗪氨靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Triforin
人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL地布卡因質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dibucaine
MuM-2C細(xì)胞， 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞 赭綠青霉 小鼠成纖維細(xì)胞;φ2鹽酸地布卡因-d9質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dibucaine-d9 Hydrochloride
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)多利培南質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doripenem
LLC(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 多沙普侖質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxapram
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)奧沙拉秦鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BROlsalazine di
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
