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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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腐敗希瓦菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4355
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4355
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

腐敗希瓦菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)

Shewanella putrefaciens PCR

BKP4355

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
6-Aminoindazole  6967-12-0  中文名:6-氨基吲唑  分子式:C7H7N3    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測試盒   可見分光光度法   25/24           

(R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  86695-06-9  中文名:(R)-(+)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式:C17H21NO    損傷分子1   英文名稱:   Human Kidney Injury Molecule 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   KIM-1

N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine  4836-13-9  中文名:N4-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷  分子式:C16H17N3O5    內(nèi)皮生長因子受體2   英文名稱:   Human Kinaseinse Domain Receptor/VEGFR2   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   KDR

N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine  64325-78-6  中文名:N6-苯甲?;?/span>-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷  分子式:C38H35N5O6    2型肺泡細(xì)胞表面抗原   英文名稱:   Human Krebs Von den Lungen 6   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   KL-6

N4-Benzoylcytidine  13089-48-0  中文名:N4-苯甲酰胞苷  分子式:C16H17N3O6    特異性透明質(zhì)酸受體Layilin   英文名稱:   hyalurona receptor Layilin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   Layilin
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名:  分子式:C8H8OS2  度:98.0%

兔結(jié)締組織生長因子(rabbit CTGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  239463-72-0  中文名:  分子式:C22H25N3O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名:  分子式:C13H15N3O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Chloro-6-iodoquinazoline  98556-31-1  中文名:  分子式:C8H4ClIN2 

兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  中文名:  分子式:C14H10BrN  度:98.0%
腐敗希瓦菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)NCI-H524 人小細(xì)胞新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Neohesperidin

mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞新穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Neoandrographolide

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)新芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Neomangiferin

;HFL1 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Arbutin

293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA辛辣內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pungiolide A
MM,
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse魯米諾100毫克

RK1 Others Human kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,4-二安基-6-本基-13,5-三嗪 2,4-Dicmino-6-phqnyl-1,3,5-triczinq 91-76-9

人胚肺細(xì)胞系;KuMA重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF1

大鼠神經(jīng)皮質(zhì)細(xì)胞(RNc)(1×106)麗春紅2Rshēng huà shì jì容量:28°C100

CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL41288-96-42--5-羥基2-Chloro-5-xy7noxypyridine

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:腐敗希瓦菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


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