產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4399 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Streptococcus pneumoniaePCR | BKP4399 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Abscisic acid 14375-45-2 中文名:脫落酸 分子式:C15H20O4 D-Lactosemonohydrate 500g
(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone 152305-23-2 中文名:(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮 分子式:C10H12N2O2 二硫赤鮮醇 5g
2-Amino-3-Formylchromone 61424-76-8 中文名:2-氨基-3-甲?;?/span> 分子式:C10H7NO3 DL-DTE
Acid Black 1 1064-48-8 中文名:酸性黑 1 分子式:C22H14N6Na2O9S2 乳酸脫氫酶elisa試劑盒 乳酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 乳酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:乳酸脫氫酶試劑盒、乳酸脫氫酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5-Aminofluorescein 3326-34-9 中文名:5-氨基熒光素 分子式:C20H13NO5 人組織因子途徑抑制物elisa試劑盒 人組織因子途徑抑制物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人組織因子途徑抑制物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織因子途徑抑制物試劑盒、人組織因子途徑抑制物elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 度:98.0%
兔子雌二醇(E2)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 202337-44-8 中文名:6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8
兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8
兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one 中文名: 分子式:C29H46O2 度:%
兔子層連蛋白elisa試劑盒 兔子層連蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子層連蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子層連蛋白試劑盒、兔子層連蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Hydroxymethylfurfural 67-47-0 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3
鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)MBL2 Others Human 人 MBL2 / MBL / COLEC1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 原蘇木素B/原巴西蘇木素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Protosappanin B
人神經(jīng)細(xì)胞裂解物HNL遠(yuǎn)志酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Polygalacic acid
牛腎細(xì)胞;MDBK 人咽鱗癌細(xì)胞,FaDu細(xì)胞 Nb2-11細(xì)胞,小鼠瘤細(xì)胞遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Senegenin
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM932月桂1(香葉1)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥80%,標(biāo)準(zhǔn)品Myrcene
THSD1 Others Mouse 小鼠 THSD1 / TMTSP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 原兒茶醛,3,4-二羥基苯質(zhì)量規(guī)格:≥98%3,4-Dihydroxybenzaldehyde
大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基50毫升2~8℃
Hce-8693細(xì)胞,人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Rb細(xì)胞 人Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi炳1醋;敗脂醋 ccrylic ccid;qthylqnq ccrboxylic ccid;Propqnoic ccid;VinylforMic ccid 1979-10-7
HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25'-二1酸鳥苷 Guanosine 5′-diphosphate (GDP,... 43139-22-6 25MG 核酸衍生物
ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) GIEMSASTAIN吉姆色素染料生物染料級綠色粉末RTsigma
人平滑肌細(xì)胞HPSMCFolicacid 5g/25g/100g 國產(chǎn)