產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4405 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬鏈球菌通用PCR檢測試劑盒直銷 | Streptococcus suiPCR | BKP4405 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬鏈球菌通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Acyclovir 59277-89-3 中文名:阿昔洛韋 分子式:5O3 快速H-E組織細胞及脫落細胞染液 Phosphate buffer
4-Aminobenzophenone 1137-41-3 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 瑞-吉染色劑 100ml
N-Acetylcaprolactam 1888-91-1 中文名:N-乙酰己內(nèi)酰胺 分子式:C8H13NO2 Wright's-GiemsaStainingSolion
4-Aminoantipyrine 1983/7/8 中文名:4-氨基安替比林 分子式:C11H13N3O 蛋白標準(5mg/mlBSA) 1ml
2-Amino-5-chlorobenzophenone 719-59-5 中文名:2-氨基-5-氯二苯甲酮 分子式:C13H10ClNO 1-乙 25g
兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子肝細胞生長因子elisa試劑盒 兔子肝細胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子肝細胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子肝細胞生長因子試劑盒、兔子肝細胞生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 7-Amino-4-methylcoumarin 26093-31-2 中文名:7-氨基-4-甲基香豆素 分子式:C10H9NO2 度:98.0%
兔子肝細胞生長因子elisa試劑盒 兔子肝細胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子肝細胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子肝細胞生長因子試劑盒、兔子肝細胞生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid 22252-43-3 中文名: 分子式:C8H10N2O3S 度:98.0% 關鍵詞:
兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7-Acetoxy-4-methylcoumarin 2747/5/9 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 分子式:C12H10O4 度:95.0% 關鍵詞:
兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 中文名: 分子式:C10H10ClNO
豬鏈球菌通用PCR檢測試劑盒直銷LY96 Others Mouse 小鼠 LY-96 / ESOP-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十三烷(>99.0%(GC),標準物質)質量規(guī)格:>99.0%(GC),標準物質Tricosane
人膀胱微內(nèi)皮細胞HBIMEC二十四烷(>99.0%(GC),標準物質)質量規(guī)格:>99.0%(GC),標準物質Tetracosane
hFOB 1.19細胞,人SV40轉染成骨細胞 人癌細胞(耐阿霉素),MCF-7/ADR細胞 小鼠小腦星形膠質細胞MA-c二甲戊樂靈(分析標準品,99%)質量規(guī)格:分析標準品,99%Pendimethaline
牛陀螺狀細胞;BT氯菊酯(標準品)質量規(guī)格:分析標準品Permethrin (isomers) solution
LY86 Others Mouse 小鼠 LY86 / MD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 殘殺威標準溶液(100μg/ml,u=2%)質量規(guī)格:100μg/ml,u=2% Propoxur solution
大鼠氣管和上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL酮基匹格列酮標記d4質量規(guī)格:美國進口Keto-Pioglitazone - Labeled d4
大鼠腎小球系膜細胞hbzy-1 Rat mesangial cell hbzy-1 DMEM(高糖)+10%FBS(或者EMEM+10%FBS)羥基匹格列酮標記d4質量規(guī)格:美國進口Hydroxy Pioglitazone Labeled d4
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標簽)匹格列酮標記的d4質量規(guī)格:美國進口Pioglitazone - Labeled d4
NCI-H1975(人) 5×106cells/瓶×2 神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)羥基匹格列酮(M-Ⅳ)質量規(guī)格:美國進口Hydroxy Pioglitazone (M-IV)
少突膠質前體細胞分化培養(yǎng)基OPCDMN-氧基帕洛諾司瓊質量規(guī)格:美國進口Palonosetron N-Oxide