產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4418 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
病毒PCR檢測試劑盒說明書 | BKP4418 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Alogliptin benzoate 850649-62-6 中文名:阿格列汀苯甲酸鹽 分子式:C25H27N5O4 人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile 865758-96-9 中文名: 分子式:C13H10ClN3O2 人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Alogliptin 850649-61-5 中文名:阿格列汀 分子式:C18H21N5O2 人組織蛋白酶S(cath-S)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(-)-Mandelic acid benzyl ester 97415-09-3 中文名:D-(-)-扁桃酸芐酯 分子式:C15H14O3 人組織蛋白去乙?;?/span>elisa試劑盒 人組織蛋白去乙?;冈噭┖?/span> 規(guī)格型號:96T/48T 人組織蛋白去乙?;冈噭┖校?guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白去乙?;冈噭┖?、人組織蛋白去乙?;?/span>elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 147118-37-4 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S 人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒 人組織蛋白酶抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人組織蛋白酶抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶抗體試劑盒、人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (Z)-Lachnophyllum lactone 81122-95-4 中文名: 分子式:C10H10O2 度:% 關鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit ELISA. 96T/48T 8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione 中文名: 分子式:C10H9BrN4O2
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil 中文名: 分子式:C28H37N5O10S2 度:98.0%
兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子可溶性CD40配體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal 中文名: 分子式:C35H52O5
病毒PCR檢測試劑盒說明書LAYN Others Human 人 Layilin 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸鈣(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous
CM-H084人臍平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL二環(huán)己基碳二亞胺(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide
SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 人細胞裂解液 (陽性對照) 丁二酸二甲酯(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDimethyl succinate
小鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL二甲基甲酮鈉鹽(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRDimethylglyoxime salt
L6565小鼠克隆細胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS直接藍71(≥50%,BR)質(zhì)量規(guī)格:≥50%,BRDirect blue 71
軟骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-苯甲酰-2'-脫氧胞苷質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRbz-dC
MAP3K8 Others Human 人 TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N6-苯甲酰-2'-脫氧腺苷質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRbz-dA
KM小鼠子瘤株;U145'-O-三苯甲基尿苷質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRTrt-rU
NIH/3T3細胞,胚胎成纖維細胞 人高轉(zhuǎn)移細胞,LM3細胞 CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2Trt-dU質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTrt-dU
倉鼠腎細胞;BHK-21N2-洛沙坦-洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。