產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4253 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
單胞菌通用PCR檢測試劑盒直銷 | Pseudomonas spp.PCR | BKP4253 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:單胞菌通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic 中文名: 分子式:C13H16O5 度:98.0% 豚鼠肝細胞生長因子elisa試劑盒 豚鼠肝細胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠肝細胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠肝細胞生長因子試劑盒、豚鼠肝細胞生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
Repaglinide 中文名:瑞格列奈 分子式:Repaglinide 度:98.0% 兔子脫氫表雄酯elisa試劑盒 兔子脫氫表雄酯試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子脫氫表雄酯試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子脫氫表雄酯試劑盒、兔子脫氫表雄酯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
3-Amino-2,6ione 中文名: 分子式:C5H9ClN2O2 度:98.0% 細胞毒 T 細胞相關抗原 4(CTLA-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 度:98.0% 結締組織生長因子 (CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Ezetimibe 中文名:依澤替米貝 分子式:C24H21F2NO3 度:98.0% 心肌營養(yǎng)素 -1(CT-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
人維生素D(VD)ELISAKit ELISA. 96T/48T 中文名: 分子式:C29H39N5O8
人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzothiazolol 中文名:2-羥基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS
人突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 中文名: 分子式:C19H14F2O6
人鐵蛋白(FE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human FE (Ferritin) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19
人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO
單胞菌通用PCR檢測試劑盒直銷SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-4-甲氧基肉桂酸質量規(guī)格:美國進口3-Hydroxy-4-methoxycinnamic
CL-0047C6(大鼠細胞)5×106cells/瓶×2吡嗪酰胺-d3質量規(guī)格:美國進口Pyrazinamide-d3
CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 地美環(huán)素質量規(guī)格:美國進口Demeclocycline
小鼠腸微細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地美環(huán)素半水化合物質量規(guī)格:美國進口
293LVT人胚腎細胞--用于慢病毒包裝 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine乙基2-(6-氨基-2,3-)甘氨酸(阿那格雷雜質A)質量規(guī)格:美國進口Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A)
人臍內皮細胞;HUV-EC-C鄰硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量:100克
CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1
草魚腎細胞;GIK鋅shēng huà shì jì容量:RT5克
T24細胞,膀胱移行細胞癌細胞 子宮高分化鱗癌細胞,HCC細胞 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0908堿式碳酸鋅shēng huà shì jì容量:50毫升
615小鼠滑膜瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。