產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4495 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
布氏錐蟲供應(yīng) | Trypanosoma brucei gambiense | BKP4495 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:布氏錐蟲供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Benzyl 4-bromophenyl ketone 中文名:芐基4-溴代苯基酮 分子式:C14H11BrO 度:98.0% 小鼠抑制因子受體elisa試劑盒 小鼠抑制因子受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠抑制因子受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抑制因子受體試劑盒、小鼠抑制因子受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
2,2'-Bicinchoninic acid 中文名:2,2'-二辛可寧酸 分子式:C20H12N2O4 度:98.0% 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素elisa試劑盒 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:小鼠高靈敏度促甲狀腺激素試劑盒、小鼠高靈敏度促甲狀腺激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0% 小鼠干細(xì)胞因子elisa試劑盒 小鼠干細(xì)胞因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠干細(xì)胞因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:小鼠干細(xì)胞因子試劑盒、小鼠干細(xì)胞因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
4-Benzyloxyindole 中文名:4-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0% 小鼠肝脂酶elisa試劑盒 小鼠肝脂酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肝脂酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肝脂酶試劑盒、小鼠肝脂酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
N-Benzoyl-L-glutamic acid 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式:C12H13NO5 度:98.0% 小鼠白細(xì)胞介素25(IL-25)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞毒 T 細(xì)胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 分裝 Araliadiol 1354638-93-9 中文名: 分子式:C15H20O2 度:% 關(guān)鍵詞: ; 食用土當(dāng)歸; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
細(xì)胞凋亡抑制因子BCL-2 英文名稱: Cell appoptosis inhibitory BCL-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: BCL-2 Antipyrine 60-80-0 中文名:安替比林 分子式:C11H12N2O 度:99.0%
細(xì)胞凋亡相關(guān)基因 -2(BCL-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T Bender Anthraquinone-2-carboxylic acid 117-78-2 中文名:蒽醌-2-羧酸 分子式:C15H8O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒 100次 Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt 853-35-0 中文名:蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽 分子式:C14H6Na2O8S2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
細(xì)胞凋亡(TdT介導(dǎo)的原位末端切口平移雙標(biāo)記法)檢測(cè) Vitamin E (VE) detection Averantin 中文名: 分子式:C20H20O7 度:%
布氏錐蟲供應(yīng)HSAEpC-c 人類氣道上皮細(xì)胞(HSAEpC) 500,000cells 組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml3-氧西酞普蘭質(zhì)量規(guī)格:3-Oxo Citalopram
原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml(R)-草酸西酞普蘭質(zhì)量規(guī)格:(R)-Citalopram Oxalate
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 西酞普蘭N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:Citalopram N-Oxide
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2(S)-西酞普蘭N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:(S)-Citalopram N-Oxide
Calu-6細(xì)胞,人細(xì)胞系(未分化) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-2G細(xì)胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL去甲基雷諾嗪質(zhì)量規(guī)格:Desmethyl Ranolazine
TNFSF13 Others Mouse 小鼠 TNFSF13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) HTSNEXTGELKIT高通量NEXT膠試劑盒蛋白組學(xué)級(jí)1 KitCOLD
人小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL草醋艾司西酞普蘭雜質(zhì)A隊(duì)照品 (-)-4-(4-Dimqthylcmino)-1-(4-fluorophqnyl)-1-(xy7noxybuty)-3-xy7noxymqthyl)-bqnzonitnilq hqmi D-(+)-di-p-toloyltcrtcric ccid sclt 18173-23-2
P388細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 空腸彎曲桿菌 大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-1錄沙坦鉀 Loscrtcn PotcssiuM; 14720-99-8
CCL20 Protein Mouse 重組小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-亮酸1克RT
P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-芴甲氧羰?;?/span>-L-谷酰胺NA