產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4522 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書 | Vibrio campbelliiPCR | BKP4522 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Bupivacaine 18010-40-7 中文名:鹽酸布比卡因 分子式:C18H29ClN2O 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Buergerinin G 263764-83-6 中文名: 分子式:C9H12O4 度:% 關鍵詞: 北玄參; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠酶(CA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Bromhexine 611-75-6 中文名:鹽酸溴己新 分子式:C14H21Br2ClN2 度:98.0% 小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Brinzolamide 138890-62-7 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠胃動素(MTL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Bortezomib 179324-69-7 中文名:硼替佐米 分子式:C19H25BN4O4 度:98.0% 小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit ELISA. 96T/48T Clevidipine butyrate 中文名:丁酸氯維地平 分子式:C21H23Cl2NO6 度:98.0%
小鼠Ⅰ型膠原C端肽elisa試劑盒 小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原C端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Benzanthrone 1982/5/3 中文名:苯并蒽酮 分子式:C17H10O 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Deoxyneocryptotanshinone 中文名: 分子式:C19H22O3
小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Loxoprofen 中文名:洛索洛芬 分子式:C15H18O3
小鼠8異素elisa試劑盒 小鼠8異素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠8異素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8異素試劑盒、小鼠8異素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Benzanthrone 1982/5/3 中文名:苯并蒽酮 分子式:C17H10O
坎氏弧菌PCR檢測試劑盒說明書HFF-1(人成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(S,S)-(+)-2,3-Butanediol
hMoCD14+-PB single donorPellet 人類外周血CD14+單核細胞團塊單一來源,超 > 1 mio.cells 人腦微內(nèi)皮細胞RNAHBMEC miRNA5 μg(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)(-)-Camphanic Acid
CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基100mL苦玄參苷IV(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Picfeltarraenin IV
ENPP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 ENPP3 / CD203c 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 瓜子金皂苷XXXI(對照品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Polygalasaponin XXXI
神經(jīng)細胞培養(yǎng)基NM俾斯麥棕R質(zhì)量規(guī)格:BSBismarck Brown R
CADM3 Others Mouse 小鼠 CADM3 / IGSF4B / NECL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 3’-單1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Adenosine 3'-monophosphate salt
腎皮層上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)腺苷 3',5'-二1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Adenosine 3',5'-diphosphate salt
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 2',5'-二1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Adenosine 2',5'-diphosphate salt
大鼠腎上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL腺苷5'-O-硫一1酸二鋰鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Adenosine 5'-O-thiomonophosphate dilithium salt
MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠B細胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSα-酮戊二酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品2-Ketoglutaric acid
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。