|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4490 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Trionyx Sinensis Spherovirus(TSSV)PCR | BKP4490 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
Benzoyleneurea 中文名：亞苯甲?；?/span> 分子式：C8H6N2O2 度：98.0% 小鼠激酶(PK)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N-Benzylmaleimide 中文名：N-芐基馬來 分子式：C11H9NO2 度：98.0% 小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit ELISA. 96T/48T
Benzyl nicotinate 中文名：煙酸芐酯 分子式：C13H11NO2 度：98.0% 小鼠標(biāo)志物(CA724)ELISAKit ELISA. 96T/48T
(R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol 中文名：(R)-(+)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚 分子式：C20H14O2 度：98.0% 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
5-Benzyl L-glutamate 中文名：L-谷氨酸5-芐酯 分子式：C12H15NO4 度：98.0% 小鼠基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
維生素B2/核黃素 英文名稱： Human Vitamin B2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： VB2 Androstadienedione 897-06-3 中文名：1,4-雄烯二酮 分子式：C19H24O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
維生素B2（VB2）檢測 Detection of malic dehydrogenase Androstadienedione 中文名：1,4-雄烯二酮 分子式：C19H24O2 度：98.0%
維生素B1（VB1）檢測 The total amino acid (TAA) detection Androstanolone 17-benzoate 1057-07-4 中文名：雄諾龍苯甲酸酯 分子式：C26H34O3
微量游離血紅蛋白測試盒 ace free hemoglobin test case Retigabine 150812-12-7 中文名：瑞替加濱 分子式：C16H18FN3O2
微量游離血紅蛋白（FHb）測定試劑盒（比色法） Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 中文名： 分子式：C28H42N6O8S2
中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書HUVEC pre-screened Pellet 人臍內(nèi)皮細(xì)胞(預(yù)選型) > 1 mio.cells 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM-acf沒食子酸一水物質(zhì)量規(guī)格：>98%,ARGallic acid monohydrate
CL-0389NCI-H1688(人典型小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×21-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRa-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate
S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氫氧化鈣(>95%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCalcium hydroxide
人無色素睫狀上皮細(xì)胞總RNAHNPCEpiC NAN-甲基糠酰羥1酸(>99.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)N-Methylfurohydroxamic Acid
大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1 大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞，A10細(xì)胞 BNL1ME A.7R.1細(xì)胞，BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞2,2'-二辛可寧酸二鉀鹽水合物(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate
人成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa氟氯西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標(biāo)準(zhǔn)品Flucloxacillin
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 巴利森苷A；派立辛質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Parishin A
非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1山楂酸,馬斯里酸質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Maslinic acid
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細(xì)胞，QG-56細(xì)胞 E14細(xì)胞，129小鼠ES細(xì)胞2-并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-T質(zhì)量規(guī)格：>98%2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid
KM3, 人細(xì)胞 Human3,4-二甲氧基肉桂酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品3,4-Dimethoxycinnamic acid
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
