產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4494 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 布氏布氏錐蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
【英文名稱】: Trypanosoma brucei bruceiPCR
【貨號(hào)】: BKP4494
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
布氏布氏錐蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate 中文名: 分子式:C16H19NO5S 度:98.0% 細(xì)胞凋亡相關(guān)基因 -2(BCL-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
2-Benzylacrylic acid 中文名: 分子式:C10H10O2 度:98.0% 腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 (BDNF) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
Racecadotril 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S 度:98.0% BMP-7 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) ADI
5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2 度:98.0% Caspase-3,6 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) ASSAY
Dorzolomide 中文名:鹽酸多佐胺 分子式:C10H17ClN2O4S3 度:98.0% 細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒 100次
戊二 (50%) 100ml Anthraglycoside B 中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷 分子式:C21H20O10 度:97.5%
戊二 (25%) 100ml Anthraquinone 84-65-1 中文名:蒽醌 分子式:C14H8O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
五羥色胺 (Serotonin/5-HT) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Anthraglycoside B 23313-21-5 中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷 分子式:C21H20O10 度:97.5% 關(guān)鍵詞:
無(wú)形體核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T Anthraflavic acid 84-60-6 中文名:二羥蒽醌 分子式:C14H8O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
無(wú)水碳酸鈣 100g Annonacin 111035-65-5 中文名: 分子式:C35H64O7 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 細(xì)胞毒活性; 番荔枝屬; 哥納香屬; 木瓣樹(shù)屬; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
HT-3細(xì)胞,人子細(xì)胞 人腎小球髓母細(xì)胞,HBZY-1細(xì)胞 軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)辛二酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BROctanedioic acid
兔腎細(xì)胞;RK-13橄欖油質(zhì)量規(guī)格:商品級(jí)Olive oil
SOST Others Human 人 SOST / Sclerostin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鄰甲氧基肉桂醛(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRo-Methoxycinnamaldehyde
CL-0103Hep G2(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2苔紅素(合成)質(zhì)量規(guī)格:BSOrcein, synthetic
IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 蔗糖1酸化酶質(zhì)量規(guī)格:BC GradeSucrose phosphorylase from L. Mesenteroides
布氏布氏錐蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 HumanAmmoniumferrilbrown枸櫞酸鐵250毫克AR,98%
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4- 4-Methoxyacetophenone,99% 100-06-1 10G 通用試劑
人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟總RNAHPA-v NA肖醋胍(*)¤ Gucnidinq nitnctq 206-93-4
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) FastblueBBsalt堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽1公斤高,98%
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL24602-84-0法尼醇FARNESOL
PCR檢測(cè)試劑盒
布氏布氏錐蟲PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。