產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63243 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
乙型病毒Victoria/YamagataPCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63243 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
山梨醇含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 3-Aminopiperidine di 334618-23-4 中文名: 分子式:C5H14Cl2N2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
色素上皮細胞衍生因子 (PEDF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Peri acid 82-75-7 中文名:周位酸 分子式:C10H9NO3S 度:98.0%
傘形 10g 4-Aminobenzophenone 中文名:4-氨基二苯甲酮 分子式:C13H11NO 度:99.0%
三乙酸 100g 3-Aminoadamantan-1-ol 702-82-9 中文名: 分子式:C10H17NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
三0酸腺苷酶 英文名稱: Rat Adenosine iphosphate 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫:
ATP 3-Amino-5-phenylpyrazole 1572-10-7 中文名:3-氨基-5-苯基吡唑 分子式:C9H9N3 度:98.0%
CCL5 Others Human CCL5 細胞裂解液 (陽性對照) B質(zhì)量規(guī)格:ARSudan Red B/Solvent Red 25
大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-67B/溶劑紅19/脂肪紅7B質(zhì)量規(guī)格:BSSudan Red 7B/Solvent Red 19
NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 100Vacuum pump oil
CM-M119小鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)質(zhì)量規(guī)格:Viscosity Grade 150Vacuum pump oil
SKOV3/Taxol-25, 紫杉醇耐藥細胞株
單核細胞型瘤細胞,THP 1細胞 FaDu(咽鱗癌細胞)紫尿酸 一水合物(97%)質(zhì)量規(guī)格:0.97Violuric
acid monohydrate
ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 細胞裂解液 (陽性對照) 氯化熒光素(>90.0%(HPLC))Fluorescein Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)
*成纖維細胞總RNAHCF NA2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))2',7'-Dichlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
CROT Others Human CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))2,3-Diaminonaphthalene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M1溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))Dimidium Bromide質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N)
SMMC-7721細胞,細胞 羊膜細胞系,Wish細胞
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C117-(二甲基氨基)-4-甲基(>95.0%(GC)(T))7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
Caudatin 中文名:告達庭 分子式:C28H42O7 度:98.5% 兔單核細胞趨化蛋白-1(rabbit
MCP-1) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進口分裝
Ponasterone A 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6 度:98.0% 兔基質(zhì)金屬蛋白酶-1(rabbit MMP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Stigmasta-5,8-dien-3-ol 中文名: 分子式:C29H48O 度:% 兔基質(zhì)金屬蛋白酶-2(rabbit MMP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
乙型病毒Victoria/YamagataPCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Tenacissoside F 中文名:通關(guān)藤苷F 分子式:C35H56O12 度:% 兔肌鈣蛋白Ⅰelisa試劑盒 兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔肌鈣蛋白Ⅰ elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Ergosterol peroxide 中文名:過氧化麥角甾醇 分子式:C28H44O3 度:96.0% 兔環(huán)0酸腺苷elisa試劑盒 兔環(huán)0酸腺苷試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔環(huán)0酸腺苷試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔環(huán)0酸腺苷試劑盒、兔環(huán)0酸腺苷elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。