產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63701 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63701 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠促黃體生成激素 英文名稱: leinizing hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LH Labetalol 32780-64-6 中文名:鹽酸拉貝洛爾 分子式:C19H25ClN2O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠促黃體激素elisa試劑盒 小鼠促黃體激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠促黃體激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠促黃體激素試劑盒、小鼠促黃體激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Clemastine fumarate 14976-57-9 中文名:富馬酸氯馬斯汀 分子式:C25H30ClNO5 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Cleroindicin C 中文名: 分子式:C8H12O3
小鼠促黃體激素(LH)ELISAKit ELISA. 96T/48T Convallagenin B 中文名:鈴蘭皂苷元B 分子式:C27H44O6 度:97.5%
小鼠促紅細(xì)胞生成素 英文名稱:
erythropoietin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EPO
Floribundone 1 118555-84-3 中文名: 分子式:C32H22O10 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 光葉決明; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精Me-β-CD質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IMR-32 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞埃博霉素B;帕土匹龍Epothilone B(EPO906, Patupilone) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CEM/C1急性細(xì)胞細(xì)胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSA 83-01;A83-01A8301質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白Amresco 進(jìn)分瓊脂粉Agar質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分
小鼠垂體細(xì)胞(MPC)(5×105)
5637, 細(xì)胞 Human氟伏沙明Fluvoxamine質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四氫甲基嘧啶羧酸(>98%,BR)Ectoine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
視網(wǎng)膜muller細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氧化鎂碳酸鈉合劑Eschka's mixture質(zhì)量規(guī)格:BC
GH3細(xì)胞,大鼠埀體瘤細(xì)胞 5637(細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6乙酯(>98%,BR)Ethyl dodeconoate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EFNA1 Protein Human 重組 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)乙基曙紅(>95%,BS)Ethyl eosin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS
HCCLM3(高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many
types of cells包裝:5 × 105方(1ml)沒食子酸乙酯Ethyl gallate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
2-Fluoroadenosine 146-78-1
中文名: 分子式:C10H12FN5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 122111-01-7 中文名: 分子式:C19H14F2O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 121660-11-5 中文名: 分子式:C19H16FNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde 121660-37-5 中文名: 分子式:C19H14FNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2 英文名稱: maix metalloproteinase 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MMP-2
2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline 146578-99-6 中文名: 分子式:C31H25FNOP 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3 英文名稱: maix metalloproteinase 3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MMP-3
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR