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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶elisa試劑盒 小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶試劑盒、小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Doxifluridine 3094/9/5 中文名： 分子式：C9H11FN2O5

小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Doxycycline  564-25-0 中文名：多西環(huán)素 分子式：C22H24N2O8

小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Doxapram  monohydrate 中文名：鹽酸多沙普侖 分子式：C24H33ClN2O3 度：98.0%

小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白elisa試劑盒 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Dorzolomide 中文名：鹽酸多佐胺 分子式：C10H17ClN2O4S3 度：98.0%

小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Deflazacort  14484-47-0 中文名：地夫可特 分子式：C25H31NO6
FCGR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32b / FCGR2B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 23-羥基羽扇豆20(29)-1-28–酸;白頭翁皂苷DV質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HBMEC 腦微內(nèi)皮細(xì)胞羅漢果皂苷IvaMogroside IVa 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K13A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-β-環(huán)糊精水合物(>97.0%(T))3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-β-cyclodextrin Hydrate質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)

lovo, 細(xì)胞3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-α-環(huán)糊精水合物(>90.0%(HPLC))3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-α-cyclodextrin Hydrate質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)

癌細(xì)胞;MDA-MB-157 大鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-γ-環(huán)糊精水合物(>95.0%(HPLC))3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-γ-cyclodextrin Hydrate質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)
NP Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 去甲基鹽酸左氧氟沙星Desmethyl Levofloxacin 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

小鼠前低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);MFC-B5-GFP左氧氟沙星Levofloxacin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 色素瘤細(xì)胞，B16細(xì)胞 Pr-HNV8細(xì)胞，菜青蟲(chóng)卵巢細(xì)胞左氧氟沙星-d8Levofloxacin-d8質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA5-羥基氯諾昔康5-Hydroxy Lornoxicam質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

KNG1 Others Mouse 小鼠 KNG1 / BDK / kininogen-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氯諾昔康-d4Lornoxicam-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
Cefixime  79350-37-1  中文名：頭孢克肟 分子式：C16H15N5O7S2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠凝血酶敏感蛋白-1 英文名稱(chēng)： thrombospondin 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： TSP-1

Cefcapene pivoxil   147816-24-8  中文名：鹽酸頭孢卡品酯 分子式：C23H32ClN5O9S2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠調(diào)節(jié)蛋白 英文名稱(chēng)： thrombomodulin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： TM

Caudatin  38395-02-7  中文名：告達(dá)庭 分子式：C28H42O7 度：98.5% 關(guān)鍵詞： 小鼠TH糖蛋白 英文名稱(chēng)： Mouse Tamm Horsfall Protein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： THP

Catalponol methylthiomethyl ether  1432057-74-3  中文名： 分子式：C17H22O2S 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠抗酸性0酸酶5 英文名稱(chēng)： Mouse Tarate Resista Acid Phosphatase 5 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： AP 5

MTHFR和MTRR基因檢測(cè)試劑盒)Catalponol  34168-56-4  中文名： 分子式：C15H18O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 梓; 四氫萘酮; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠尿微量白蛋白（ALB）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝