產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63405 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63405 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子可溶性CD40配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid 中文名:喹方 分子式:C9H6INO4S
兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 160129-45-3 中文名: 分子式:C10H10ClNO
兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體elisa試劑盒 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒、兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵welisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 7α-Hydroxystigmasterol 64998-19-2 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2
兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體elisa試劑盒 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w試劑盒、兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 7α-Hydroxysitosterol 34427-61-7 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2
兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 中文名: 分子式:C29H46O3 度:97.5%
小鼠;F9 小鼠腸微細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL克林霉素1酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:用于含量測(cè)定Clindamycin Phosphate
RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞 Rattus克羅拉濱/氯法拉濱質(zhì)量規(guī)格:> 99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Clofarabine
EPHB3 Others Mouse 小鼠 EPHB3 / HEK2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1酸溴莫尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Brimonidine tartrate
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0905伊馬替尼質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Imatinib
WWP2 Others Human WWP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿利克侖-5質(zhì)量規(guī)格:>98%Aliskiren Inter-5
病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Colo320DM細(xì)胞,細(xì)胞 胎兒*間充質(zhì)細(xì)胞,FBM細(xì)胞
永生化細(xì)胞;CNLMG-B5537LC泛昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Famciclovir質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氟達(dá)拉濱1酸酯Fludarabine Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,BR
BCAM Others Human BCAM 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 噴昔洛韋Penciclovir質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
膀胱平滑肌細(xì)胞總RNAHBdSMC NA伊曲康唑Itraconazole質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 伊曲康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Itraconazole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Abiraterone acetate 中文名:乙酸阿比特龍酯 分子式:C26H33NO2 度:98.0% 肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
Esomeprazole 中文名:埃索美拉唑鈉 分子式:C17H19N3NaO3S 度:98.0% 脫脂奶粉 100g
Clevidipine butyrate 中文名:丁酸氯維地平 分子式:C21H23Cl2NO6 度:98.0% Skimmilk 500g
Azilsartan 中文名:阿齊沙坦 分子式:C25H20N4O5 度:98.0% 超氧化物歧化酶 30KU
1-Methyl-5-amino-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C14H19N3O2 度:98.0% SOD 3KU
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。