產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63727 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
對蝦病毒(IMNV)PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63727 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate 139481-44-0 中文名: 分子式:C25H21N3O3
小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Dabigatran etexilate 211915-06-9 中文名: 分子式:C34H41N7O5
小鼠二(MDA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Gracillin 中文名:纖細(xì)薯蕷皂苷 分子式:C45H72O17
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 D(-)-Arginine 中文名:D-精氨酸 分子式:C6H14N4O2
小鼠多效生長因子 英文名稱:
Pleioophin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PTN
Gemcitabine 95058-81-4 中文名:吉西他濱 分子式:C9H11F2N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞L-谷氨酸L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
3T3/e細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞 腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μgL-延胡索乙素L-Tetrahydropalmatine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1尼可地爾-d4Nicorandil-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EPHB4 Others Human EphB4 / HTK 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼可地爾N-氧化物Nicorandil N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM16-羥基尼可地爾6-Hydroxy Nicorandil質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
JEC, 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系參二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Panaxadiol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 小鼠*癌beta細(xì)胞,Beta-TC-6細(xì)胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細(xì)胞)參三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Panaxatriol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
紅系細(xì)胞;TF-1參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品)Compound K質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品
HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 參皂苷F1(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside F1質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]參皂苷F2(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside F2質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 2374-03-0
中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α 英文名稱: Macrophage Inflammatory
protein 3α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MIP-3α
4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 116-63-2 中文名:4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0% 小鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Amino-3,5-dichloropyridine 22889-78-7 中文名: 分子式:C5H4Cl2N2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide 52298-44-9 中文名:4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺 分子式:C14H16N2O4S 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
對蝦病毒(IMNV)PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 2549-87-3 中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮 分子式:C16H14O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝