產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63838 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
禽病毒J型(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63838 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1β(mouse MIP-1β) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D Dyphylline 中文名:二羥丙茶堿 分子式:C10H14N4O4
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 g (mouse MIP-1 g ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D Dyphylline 中文名:二羥丙茶堿 分子式:C10H14N4O4 度:98.0%
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 a (mouse MIP-1 a /CCL3) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 原裝進(jìn)口 Dyphylline 479-18-5 中文名:二羥丙茶堿 分子式:C10H14N4O4
小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Clemastine fumarate 中文名:富馬酸氯馬斯汀 分子式:C25H30ClNO5 度:98.0%
小鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Duloxetine 中文名:鹽酸度洛西汀 分子式:C18H20ClNOS 度:98.0%
mCF, 小鼠*成纖維細(xì)胞 MouseN-芐氧羰基-L-蘇氨酸Z-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98
FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽N-Benzylglycine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
癌細(xì)胞;MDA-MB-453N-芐基甘氨酸乙酯N-Benzylglycine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )氨基扎那米韋Zanamivir Amine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CL-0431RT4(膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀羧酸代謝產(chǎn)物Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
PANC-1(*癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2腺苷3',5'-環(huán)單1酸鹽,N6-苯甲酰-鈉鹽Adenosine 3′,5′-cyclic
Monophosphate, N6-Benzoyl-, Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076P1,P5-Di(腺苷-5'-)五1酸鹽,三鋰鹽P1,P5-Di(adenosine-5’-)pentaphosphate, Trilithium Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 腺苷5‘-O-(-2-硫代三1酸)三鋰鹽Adenosine 5′-O-(2-Thiodiphosphate), Trilithium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
MCF-7 [MCF7], 癌細(xì)胞系2-甲基硫代二1酸腺苷2-Methylthio-ADP 3 salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Daturataturin A
133360-51-7 中文名: 分子式:C34H48O10 度:93.0% 關(guān)鍵詞: 曼陀羅屬; 曼陀羅; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Daturametelin I 904667-65-8 中文名: 分子式:C34H48O10 度:93.0% 關(guān)鍵詞: 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠趨化因子(mouse RAES) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
D-Aspartic acid 1783-96-6 中文名:D-天冬氨酸 分子式:C4H7NO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Dasatinib 302962-49-8 中文名:達(dá)沙替尼 分子式:C22H26ClN7O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(mouse sRANKL) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
D-arabinitol 488-82-4 中文名: 分子式:C5H12O5 度:% 關(guān)鍵詞: 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
禽病毒J型(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR