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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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禽病毒J型(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63838
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-30
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63838
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

禽病毒J(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR)

50T

BK-P63838

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 76,54,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1β(mouse MIP-1β)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D  Dyphylline  中文名:二羥丙茶堿  分子式:C10H14N4O4 

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 g (mouse MIP-1 g )   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D  Dyphylline  中文名:二羥丙茶堿  分子式:C10H14N4O4  度:98.0%

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 a (mouse MIP-1 a /CCL3)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   原裝進(jìn)口     Dyphylline  479-18-5  中文名:二羥丙茶堿  分子式:C10H14N4O4 

小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Clemastine fumarate  中文名:富馬酸氯馬斯汀  分子式:C25H30ClNO5  度:98.0%

小鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Duloxetine   中文名:鹽酸度洛西汀  分子式:C18H20ClNOS  度:98.0%
mCF, 小鼠*成纖維細(xì)胞 MouseN-芐氧羰基-L-蘇氨酸Z-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格:0.98

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽N-Benzylglycine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

癌細(xì)胞;MDA-MB-453N-芐基甘氨酸乙酯N-Benzylglycine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )氨基扎那米韋Zanamivir Amine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

CL-0431RT4(膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2維達(dá)列汀羧酸代謝產(chǎn)物Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
PANC-1(*癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2腺苷3',5'-環(huán)單1酸鹽,N6-苯甲酰-鈉鹽Adenosine 3,5-cyclic Monophosphate, N6-Benzoyl-,  Salt  質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

Promocell C-28020 Hematopoietic ProgenitorMedium, 造血祖細(xì)胞培養(yǎng)基(即用型) 100ml腺苷 2':3'-環(huán)單1酸鹽鈉鹽Adenosine 2':3'-cyclic monophosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076P1,P5-Di(腺苷-5'-)1酸鹽,三鋰鹽P1,P5-Di(adenosine-5-)pentaphosphate, Trilithium Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 腺苷5-O-(-2-硫代三1酸)三鋰鹽Adenosine 5-O-(2-Thiodiphosphate), Trilithium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

MCF-7 [MCF7], 癌細(xì)胞系2-甲基硫代二1酸腺苷2-Methylthio-ADP 3 salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Daturataturin A  133360-51-7  中文名:  分子式:C34H48O10  度:93.0%  關(guān)鍵詞:  曼陀羅屬; 曼陀羅; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Daturametelin I  904667-65-8  中文名:  分子式:C34H48O10  度:93.0%  關(guān)鍵詞:  甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠趨化因子(mouse RAES)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

D-Aspartic acid  1783-96-6  中文名:D-天冬氨酸  分子式:C4H7NO4  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠抵抗素(mouse Resistin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

Dasatinib  302962-49-8  中文名:達(dá)沙替尼  分子式:C22H26ClN7O2S  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(mouse sRANKL)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

D-arabinitol  488-82-4  中文名:  分子式:C5H12O5  度:關(guān)鍵詞:  對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
禽病毒J型(ALV-J)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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