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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

細(xì)胞毒 T 細(xì)胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Araliadiol  1354638-93-9  中文名：  分子式：C15H20O2  度：%  關(guān)鍵詞：  *; 食用土當(dāng)歸; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

細(xì)胞凋亡抑制因子BCL-2   英文名稱：   Cell appoptosis inhibitory BCL-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BCL-2  Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O  度：99.0%   

細(xì)胞凋亡相關(guān)基因 -2(BCL-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  Anthraquinone-2-carboxylic acid  117-78-2  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒   100次  Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  853-35-0  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式：C14H6Na2O8S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)胞凋亡（TdT介導(dǎo)的原位末端切口平移雙標(biāo)記法）檢測   Vitamin E (VE) detection  Averantin  中文名：  分子式：C20H20O7  度：%
NRK-52E，大鼠腎細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株，293sars181A細(xì)胞 NCI-H1703 [H1703](細(xì)胞)鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL,基體:10%HCL）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:10%HCLHolmium solution

低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M-2B4鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì)：1.0mol/L 硝酸）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì)：1.0mol/L 硝酸 Iron resolution

BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利福霉素鈉；利福霉素SV鈉質(zhì)量規(guī)格：>900IU/mg ,BRRifamycin  salt

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMYF醋酸奧曲肽質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BROctreotide acetate

PDGFC Others Mouse 小鼠 PDGF-C / SCDGF 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S(+)-2-氨基-1-丁醇質(zhì)量規(guī)格：>99%,液態(tài),0.944 g/mL ,25℃(S)-(+)-2-Amino-1-butanol
FBM細(xì)胞，胎兒*間充質(zhì)細(xì)胞 *雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞(拉祜族);KM9406復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),1-2μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

U14(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>97%(TPO Method)

HT-29(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMYM復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),1-2μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2復(fù)壁碳納米管 60-100nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15μm(length)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)

IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二芐氧基芐溴(>98.0%(GC)(T))3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)
3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide  中文名：3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物  分子式：C7H4O3S2  度：90.0%  小鼠瘤病毒18（HPV-18）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

5-Azacytidine  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%  小鼠瘤病毒16（HPV-16）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Bathophenanthroline  中文名：紅菲繞啉  分子式：C24H16N2  度：98.0%  小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Amino-6-chloropurine  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5  度：98.0%  小鼠癌標(biāo)志物CA125ELISAKit   ELISA.   96T/48T

阪崎腸桿菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）Acetophenone tosylhydrazone  中文名：苯乙酮對甲苯磺?；?span>  分子式：C15H16N2O2S  度：98.0%  小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit   ELISA.   96T/48T