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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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隱孢子蟲PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63607
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-01
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63607
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

隱孢子蟲PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63607

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠I型膠原蛋白(COL-1ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Benzyl carbamate  中文名:氨基甲酸芐酯  分子式:C8H9NO2 

小鼠IP-10(mouse IP-10)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl carbamate  621-84-1  中文名:氨基甲酸芐酯  分子式:C8H9NO2  度:98.0%   

小鼠IgM(mouse IgM)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名:4-羥基苯甲酸芐酯  分子式:C14H12O3 

小鼠IgM   英文名稱:    immunoglobulin M   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   IgM  Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate  中文名:  分子式:C16H19NO5S  度:98.0%

小鼠IgG(mouse IgG)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名:4-羥基苯甲酸芐酯  分子式:C14H12O3  度:98.0%
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))4'-Pentylacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)

家貓肺細(xì)胞;FCA-L24-(-4-丙基環(huán)己基)苯腈(>98.0%(GC))4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S2 (aa 726-1296) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T))4-Sulfocalix[4]arene Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>94.0%(T)

腦內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)4-磺酰杯[6]芳烴水和物(>95.0%(HPLC))4-Sulfocalix[6]arene Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)

HUVEC, 臍內(nèi)皮細(xì)胞 上皮性細(xì)胞,TOV-112D細(xì)胞 RH-35(細(xì)胞)4-磺酸杯[8]芳烴水合物(>98.0%(HPLC)(T))4-Sulfocalix[8]arene Hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HDBEC-c adult 類皮膚血內(nèi)皮細(xì)胞(HDBEC)來自成年捐獻(xiàn)者 500,000cells 角膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)溴酚紅鈉Bromophenol red,  salt質(zhì)量規(guī)格:>80%,Ind Grade

食管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)硬脂酸丁酯(>98%,BR)Butyl stearate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) C10E6,10%溶液C10E6質(zhì)量規(guī)格:BR

tTA基因修飾的小鼠(B);P19-CAG-tTA-1F3C12E10,10%溶液C12E10質(zhì)量規(guī)格:BR

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A 細(xì)胞,LLC Lewis細(xì)胞 PCK細(xì)胞,大黃魚腎細(xì)胞C12E9, 10%溶液C12E9質(zhì)量規(guī)格:BR
-Androstane-3β,17β-diol  中文名:5α-雄烷二醇  分子式:C19H32O2  度:98.0%  小鼠催乳素(PRL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-O-Methyl-3-methoxymaxterone  中文名:3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇  分子式:C21H36O3  度:98.0%  小鼠抵抗素(Resistin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  中文名:3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-  分子式:C21H30O2  度:98.0%  小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

9-Dehydroandrostenedione  中文名:9-去氫雄烯二酮  分子式:C19H24O2  度:98.0%  中文名稱   方法   規(guī)格           

隱孢子蟲PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名:  分子式:C21H32O3  度:98.0%  小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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