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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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嗜血桿菌和鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BK-P63363
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-02
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-P63363
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口


魯氏毛霉   蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis
三七根腐病菌Cylindrocarponsp.   泡盛曲霉煙色變種
英諾克李斯特菌   蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種Bacillusthuringienisvar.aisawai
乳酸片球菌   卡爾斯伯酵母
谷氨酸棒狀桿菌   粗壯假絲酵母
雅致枝霉   鰒發(fā)光桿菌
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

嗜血桿菌和鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)

50T

BK-P63363

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔子Ⅰ型膠原(Col)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  6972-78-7 中文名: 分子式:C5H6N4O3

兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5α-Androstanedione 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2

兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(rabbit TGF-b1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Chlorodehydromethyltestosterone 中文名:4-氯去氫甲基 分子式:C20H27ClO2 度:98.0%

兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-b2(rabbit TGF-b2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Chlorodehydromethyltestosterone 中文名:4-氯去氫甲基 分子式:C20H27ClO2

兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-a(rabbit TGF-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Chlorotestosterone acetate  855-19-6 中文名:醋酸氯 分子式:C21H29ClO3
HCT-116細(xì)胞,低分化腺癌細(xì)胞 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞,HEC-1-A細(xì)胞 cDNAHPF cDNA依普利酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Eplerenone

長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647*度酸質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BREtodolac

HAPLN1 Others Human  HAPLN1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Irinotecan HCl Trihydrate

大鼠細(xì)胞;UMR-106硝酸異康唑質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRIsoconazole Nitrate

DUSP3 Others Human  DUSP3 / VHR 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硝酸異康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isoconazole Nitrate
CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠*瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸頭孢匹羅(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefpirome Sulfate質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定

mCF, 小鼠*成纖維細(xì)胞阿米舒必利Amisulpride質(zhì)量規(guī)格:含量≥900μg/mg,度大于99%,USP32

胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA 直腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿米舒必利(標(biāo)準(zhǔn)品)Amisulpride質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

纖維細(xì)胞;HT-1080非諾貝特酸Fenofibric acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

ITGA5&ITGB6 Others Human  ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 非諾貝特酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenofibric acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Lamivudine  中文名:拉米夫定 分子式:3O3S 度:98.0% 兔子氧化(OxLDL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Stavudine  中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4 度:98.0% 兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Albendazole  中文名:阿苯達(dá)唑 分子式:C12H15N3O2S 度:98.5% 兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  中文名:Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯 分子式:C26H26NO8P 度:98.0% 兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

嗜血桿菌和鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒 (熒光PCR法)8-Phenyloctanol  中文名:8-苯基辛醇 分子式:C14H22O 度:98.0% 兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。


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