產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63303 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
副病毒PCR分型檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63303 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
兔p物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS 度:98.0%
兔p物質(zhì)(SP)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2
兔p53(p53)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide 83846-85-9 中文名:4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚 分子式:C20H16OS
兔p53(p53)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 231278-84-5 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3
兔I型膠原(rabbit
Collagen I) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Aza-*ndrostan-1-ene-
3-one-17carboxylic acid 140700-63-6 中文名: 分子式:C19H27NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
副病毒PCR分型檢測試劑盒(熒光PCR法)EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0927博舒替尼質(zhì)量規(guī)格:> 99%,(Src/Abl)酪氨酸激酶雙重抑制劑Bosutinib,SKI-606
EFNB2 Others Mouse 小鼠 EFNB2 / EphrinB2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 布地奈德質(zhì)量規(guī)格:度大于98.5%,BRBudesonide
CM-R101大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL腐霉利(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Procymidon
HEXB Others Human Hexosaminidase B / HEXB 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 吡蚜酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Pymetrozin
小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-c敵稗(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Propanil
CCL15 Protein Human 重組 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標(biāo)簽)多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)Carbendazim solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%
SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 屈(標(biāo)準(zhǔn)品)Chrysene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16(標(biāo)準(zhǔn)品)Carbaryl質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(HPLC)
CD68 Others Human CD68 / Macrosialin / Gp110 (aa 1-319) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 毒死蜱(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlorpyrifos質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
CL-0461UACC-812(導(dǎo)管瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2滅蠅胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)Cyromazin solution質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%
Horminone
中文名:7α-羥基羅列酮 分子式:C20H28O4 度:97.5% 兔緊張素II(rabbit
Angiotensin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Dihydrotanshinone I 中文名: 分子式:C18H14O3 度:98.5% 兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Tanshinone IIB 中文名:丹參酮IIB 分子式:C19H18O4 度:97.0% 兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Tanshinone I 中文名: 分子式:C18H12O3 度:96.0% 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Neoprzewaquinone A 中文名: 分子式:C36H28O6 度:98.5% 兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR