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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-3β(mouse MIP-3β)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Ecdysterone 20,22-monoacetonide  22798-96-5  中文名：  分子式：C30H48O7 

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-3a(mouse MIP-3a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ecdysterone 20,22-monoacetonide  22798-96-5  中文名：  分子式：C30H48O7  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  蛻皮甾; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-2(mouse MIP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ecdysterone 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C30H48O7 

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白-1(mouse MIP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ecdysterone 20,22-monoacetonide  中文名：  分子式：C30H48O7  度：98.0%

小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -2(mouse MIP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D  Dyphylline  479-18-5  中文名：二羥丙茶堿  分子式：C10H14N4O4  度：98.0%
615小鼠株;Ca759 小鼠卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2,5-己二酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)2,5-Hexanedione

細(xì)胞名稱 種屬3',3'',5',5''-四溴酚酞乙酯(80%,用于顯微鏡)質(zhì)量規(guī)格：80%,用于顯微鏡3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester

EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 三十烷醇(>98%,植物激素級(jí))質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級(jí)Triacontanol

SV40T轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞;293T4-羥基苯(>98.0%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%，BR4-Hydroxybenzaldehyde

MET Others Human  c-MET / HGFR (aa 956-1390) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 低內(nèi)牛血清白蛋白質(zhì)量規(guī)格：>97%,Biotech GradeAlbumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin
PC12細(xì)胞，大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 Hep G2(細(xì)胞) 低分化;GLC-82 [GLC82]肌苷-5’-1酸二鈉鹽5-IMP，2Na質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL8 Protein Human 重組 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)尿苷-5’-二1酸鈉鹽(UDP)Uridine 5'-diphosphate  salt from 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

SPC-A-1(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5’-尿苷酸二鈉(UMP)5'-UMP-Na2質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

臍內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUVEC cDNAdAMP-Na2;脫氧腺苷1酸二鈉2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2)質(zhì)量規(guī)格：>98,BR

小鼠*上皮細(xì)胞(MREpiC)(5×105)ATP.Na2; 腺苷-5’-三1酸二鈉鹽水合物5'-ATP-Na2質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物
Deferasirox  201530-41-8  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4  度：99.0%      小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Decoquinate  18507-89-6  中文名：癸氧喹酯  分子式：C24H35NO5  度：98.0%      小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Decanedioic acid  111-20-6  中文名：  分子式：C10H18O4  度：%  關(guān)鍵詞：  脂類; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Daucosterol  474-58-8  中文名：胡蘿卜苷  分子式：C35H60O6  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  ; ; *; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物  小鼠去甲上腺素（NE）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

禽病毒（ALV）通用PCR檢測(cè)試劑盒（熒光-PCR法）Daturataturin A aglycone  904665-71-0  中文名：  分子式：C28H38O5  度：93.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。