產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63843 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
禽肺病毒(APV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63843 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Empagliflozin 中文名:依帕列凈 分子式:C23H27ClO7
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Empagliflozin 864070-44-0 中文名:依帕列凈 分子式:C23H27ClO7 度:95.0%
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISAKit ELISA. 96T/48T Clopidogrel bisulfate 135046-48-9 中文名:硫酸氫氯吡格雷 分子式:C16H18ClNO6S2
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Empagliflozin 864070-44-0 中文名:依帕列凈 分子式:C23H27ClO7
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Emodin 中文名:大黃素 分子式:C15H10O5 度:99.0%
BST2 Others Human TETHERIN / BST2 / CD317 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸萬古霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Vancomycin HCl
C57BL/6小鼠胚胎干細(xì)胞 C57BL/6 mouse embryonic stem cells凡德他尼質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Vandetanib
Hp2/o細(xì)胞,跟*瘤細(xì)胞 赭曲霉 胚;HFL-I海帶多糖;昆布糖 (來自褐藻類)質(zhì)量規(guī)格:BR,日本進(jìn)口分裝Laminarin from Laminaria digitata
SW 1990(*癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2胰酶(1:250),胰酶粉質(zhì)量規(guī)格:酶活1:250,BRPancreatin
HGC-27(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠*間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C木瓜蛋白酶(800u/mg)質(zhì)量規(guī)格:800u/mgPapain
PDIA4 Others Human ERP72 / PDIA4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟米龍醋酸酯Fluorometholone
Acetate質(zhì)量規(guī)格:>97%
狗*間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells十溴二苯Pentabromophenyl ether質(zhì)量規(guī)格:>98%
HME7細(xì)胞,色素瘤細(xì)胞 短雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;HH-29氨基雜環(huán)鹽酸鹽3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane 質(zhì)量規(guī)格:>98%
UM-UC-3(膀胱移行細(xì)胞癌) 5×106cells/瓶×2春雷霉素;春日霉素; 克死霉Kasugamycin質(zhì)量規(guī)格:>60%,BR
HUVEC(HUV-EC-C) (臍內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SW
1990 [SW-1990, SW1990] , *癌細(xì)胞 癌細(xì)胞;MDA-MB-435S土拉霉素A,托拉菌素A,泰拉霉素Tulathromycin
A質(zhì)量規(guī)格:>95%
Dibucaine 1961/12/1 中文名:鹽酸地布卡因 分子式:C20H30ClN3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Diaveridine 5355-16-8 中文名:敵菌凈 分子式:C13H16N4O2 度:98.0% 小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Dexmedetomidine 145108-58-3 中文名:鹽酸右美托咪定 分子式:C13H17ClN2 度:98.0% 小鼠熱休克蛋白糖蛋白elisa試劑盒 小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠熱休克蛋白糖蛋白試劑盒、小鼠熱休克蛋白糖蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Dexamethasone-17-acetate 1177-87-3 中文名:醋酸地塞米松 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠乳酸脫氫酶elisa試劑盒 小鼠乳酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠乳酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乳酸脫氫酶試劑盒、小鼠乳酸脫氫酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
禽肺病毒(APV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)Dexamethasone 21-phosphate di salt 2392-39-4 中文名:地塞米松磷酸鈉 分子式:C22H30FO8P 度:98.0% 小鼠乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒 小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠乳鐵傳遞蛋白試劑盒、小鼠乳鐵傳遞蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。