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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔色素上皮衍生因子elisa試劑盒   兔色素上皮衍生因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔色素上皮衍生因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-Benzoylpentanoic acid  中文名：5-苯甲?；焖?span>  分子式：C12H14O3  度：98.0%

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Azacytidine  320-67-2  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔軟骨糖蛋白39(rabbit YKL-40)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C7H4ClNO4 

兔軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Hydroxythiobenzamide  中文名：  分子式：  度：98.0%
LRG1 Others Human  LRG1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 并五苯(以升華法化)Pentacene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：

眼晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)顏料藍(lán) 15(以升華法化)Pigment Blue 15 (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

Jurkat E6-1細(xì)胞，T細(xì)胞瘤 癌細(xì)胞,4T1細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-2EpiCGS-21,2-(standard for GC, ≥99.5% (GC))1,2-Propanediol質(zhì)量規(guī)格：standard for GC, ≥99.5% (GC)

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2正十二烷基苯(analytical standard,≥99.5%(GC))1-Phenyldodecane質(zhì)量規(guī)格：analytical standard,≥99.5%(GC)

IL1RN Others Human  IL1RA / IL1F3 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-苯乙醇(GC,>99.5%(GC))2-Phenylethanol質(zhì)量規(guī)格：GC,>99.5%(GC)
CGB5 Others Human  CGB5 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 莫索尼定Moxonidine 質(zhì)量規(guī)格：度>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

家兔*間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC莫索尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)Moxonidine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

二氫葉酸還原酶缺陷型中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 細(xì)胞，TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞，鼠細(xì)胞系奈帕芬胺Nepafenac質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse奈帕芬胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Nepafenac質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 尼卡巴嗪 Nicarbazin 質(zhì)量規(guī)格：>98%
Senkyunolide E  中文名：  分子式：C12H12O3  度：%  兔子球蛋白A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

莢膜組織胞漿菌PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氫洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%  兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Glyceryl hexacosanoate  中文名：  分子式：C29H58O4  度：%  兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Digalactosyldiacylglycerol  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15  度：%  兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  兔子可溶性調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝