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免疫熒光技術實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-WNK4
中文名稱  WNK4抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Human, Mouse, Rat 
產品類型     一抗
別    名  PHA 2B; PHA2B; PRKWNK 4; PRKWNK4; Protein kinase lysine deficient 4; Protein kinase with no lysine 4; Serine/threonine protein kinase WNK4; WNK lysine deficient protein kinase 4; WNK4_HUMAN.
研究領域   心 免疫學 激酶和磷酸酶 通道蛋白
蛋白分子量   predicted molecular weight: 135kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human WNK4 C-terminus
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
產品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經常使用的抗原有：偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯物）刺激機體產生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：

（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
破骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)異丙基氧化鋁，英文名或英文縮寫：Aluminum isopropoxide，級別：BR，89%，規(guī)格：500克

FCGR2 Others Mouse 小鼠 CD32 / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) 五硼醋銨;七縮五硼醋銨 cMMoniuM pqntcborctq 1007-89-2

PK(15) 豬腎細胞N-叔丁氧羰基-L-酪酸，英文名或英文縮寫：Boc-Tyr-OMe，級別：BR，99%，規(guī)格：5克

犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild基甲基酸鹽共聚物，英文名或英文縮寫：Polyacrylic resin Ⅱ，級別：AR，37%，規(guī)格：100毫升

GBC-SD, 人細胞(甜菜堿鹽酸鹽)
急性T細胞細胞;TALL-104Chromium10克BR，99%

IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2-炳二安;炳二安;1,2-二安基炳烷 1,2-PropcnqdicMinq 78-90-0

C57BL/6小鼠骨髓間質干細胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells間本二加醋;間酞醋;間二羧基本;異本二加醋;1,3-本二羧醋 M-Phthclic ccid;Bqnzqnq-M-diccrboxylic ccid;1,3-Bqnzqnqdiccrboxylic ccid;IPc 11-91-2

SK-N-MC細胞，人神經上皮瘤細胞 蠟樣芽孢桿菌 人腎小球內皮細胞RNAHRGEC miRNA5 μgBoc-D-asparagineN-叔丁氧羰基-D-天冬酰胺1克BR，98%

SF763(人細胞) 5×106cells/瓶×281028-91-3D-果糖-1，6-二1酸三鈉(2-8℃)D-Fructose-1,6-diphosphate triwo7ium salt octahydrate
人間充質干細胞-臍帶 小鼠骨骼肌肌肉母瘤細胞，G-7細胞 P815(肥大細胞瘤細胞)硬脂酸(Standard for GC,>99%(GC))Stearic acid質量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)

人細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]環(huán)丁砜(標準品)Sulfolane質量規(guī)格：分析標準品,≥99.8% (GC)

IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)丁砜(Standard for GC,≥99.5%(GC))Sulfolane質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

中國倉鼠卵巢細胞;CHO十四烷(Standard for GC,>99%(GC))Tetradecane質量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)

LTBR Others Cynomolgus 食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(standard for GC,>99.5%)Tributyl phosphate質量規(guī)格：standard for GC,>99.5%
WNK4抗體 rCF, 大鼠成纖維細胞 A4細胞 HL-7702(肝細胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate質量規(guī)格：≥98.0%

人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶銀Silver Sulfadiazine質量規(guī)格：>98%,USP31,BR

EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶銀(標準品)Silver Sulfadiazine質量規(guī)格：>98%,標準品

人結細胞;T84辛伐他汀 Simvastatin質量規(guī)格：>99%,BR,細胞培養(yǎng)級

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀,辛伐他?。藴势罚?/span>Simvastatin質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

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