產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64741 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
0.5%葡萄糖肉湯100ml 比基尼鏈霉菌
亞麻刺盤孢 巨大芽孢桿菌 維生素B12產(chǎn)生菌
金黃色葡萄球菌金黃亞種 膠質(zhì)芽孢桿菌 細(xì)菌肥料
黃色長(zhǎng)孢鏈霉菌 巨大芽孢桿菌 有機(jī)0細(xì)菌肥料
瑞士乳桿菌 沙保羅葡萄糖瓊脂表面培養(yǎng)基60mm/25cm2
魯氏酵母 成團(tuán)腸桿菌
煙曲霉 貝酵母
師崗鏈霉菌 琥珀毛殼
栗酒裂殖酵母
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
鴨病毒PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64741 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-Naphtyol1-羥基奈5克IND
CL-0120HuH-7(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2本佐卡應(yīng) Bqnzoccinq1994-9-7
MAPKAPK3 Others Human 人 MAPKAPK3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-SerineDL-蠶絲基酸10克BR,99%
人牙周膜成纖維細(xì)胞裂解物HPLFLPATENTBLUEVF酸性藍(lán) 1(食品藍(lán) 3)超級(jí)25G129-17-9RT
SW 1088[SW-1088;SW1088]細(xì)胞,人腦星型細(xì)胞
人細(xì)胞,OS-RC-2細(xì)胞 氣管上皮細(xì)胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)ModifiedLetheenBroth 500g原裝 BD 263010
肝竇內(nèi)皮細(xì)胞HHSEC6-嘌呤-2'-脫氧核苷6-Mercaptopurine-2'-deoxyriboside質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
SERPINA6 Others Human SerpinA6 / CBG 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奧美拉唑砜Omeprazole Sulfone質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
HSF 皮膚成纖維樣細(xì)胞奧美拉唑N-氧化物Omeprazole N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CM-H131角膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-去甲氧基-4-硝基奧美拉唑硫化物4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole Sulfide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
QGY-7701, 細(xì)胞5-羥基奧美拉唑鈉鹽5-Hydroxy Omeprazole Salt質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml鹽酸美西律(標(biāo)準(zhǔn)品)Mexiletine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
LYN Others Human Lyn Kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 美洛西林鈉Mezlocillin 質(zhì)量規(guī)格:>96%,CP,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0906美洛西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Mezlocillin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CFPAC-1細(xì)胞,*癌細(xì)胞 細(xì)胞系,SUNE-1亞株-5-8F細(xì)胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞)5×106cells/瓶×2米非司酮Mifepristone質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO
DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6米非司酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Mifepristone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL二甲基亞砜(AR,>99%(GC))
Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%(GC)
HPT-8細(xì)胞,小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞) 長(zhǎng)白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184二甲基亞砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:>99.8%(GC)
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)二甲基亞砜(分子生物學(xué),≥99.9%) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué),≥99.9%
EA.hy926(人臍細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大隱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)二甲基亞砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:多肽合成
人腦微內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC二甲基亞砜(藥用級(jí)) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:藥用級(jí)
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
鴨病毒PCR試劑盒主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR