產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63219 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
病毒N4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63219 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDKN2A (Cyclin
Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3
人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit 2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人周期素依賴性激酶8(CDK8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK8 (Cyclin Depende Kinase 8) ELISA Kit 2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C26H52O3 度:98.0%
人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名: 分子式:C14H12O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 虎杖; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人周期素依賴性激酶6(CDK6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK6 (Cyclin Depende
Kinase 6) ELISA Kit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic
acid 104239-97-6 中文名: 分子式:C19H28INO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TAK875TAK-875質(zhì)量規(guī)格:>98%,GPR40激動劑
氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)GDPNa2;5’-二1酸鳥苷二鈉GDP Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
MAP4K5 Others Human MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) SU11274SU-11274質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的Met抑制劑
小鼠;F9尿苷;尿嘧啶核苷Uridine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
L6細(xì)胞,大鼠成肌細(xì)胞 低轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MHCC97-L細(xì)胞 CL-0120HuH-7(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2尿嘧啶核苷,尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Uridine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
5E Others Human
5E / CD73 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 生長激素釋放因子-2GHRP-2質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]胰素樣肽-2(1-34),GLP-2 (1-34) (human)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長)胰素(1-29),牛,,豬Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
原代滑膜皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml胰素(19-29),牛,,豬Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B 大鼠頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL胰素樣肽Ⅰ(7-36)酰胺,Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
病毒N4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2 土壤堿性0酸酶(S-AKP/ALP)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one 2398-63-2 中文名:17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮 分子式:C21H28O3 土壤纖維素酶(S-CL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 3090-70-8 中文名:3-乙?;?span>-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3 土壤酶(S-CAT)測試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one 19041-66-8 中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮 分子式:C26H30O3 土壤還原酶(S-)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
5α-Androstane-3β,17β-diol
571-20-0 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2 土壤蔗糖酶(S-SC)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR