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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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病毒N4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63219
  • 價格: ¥3800/瓶
  • 發(fā)布日期: 2021-03-13
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63219
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

病毒N4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63219

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 76,5,4,3,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit  2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid  317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3

人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit  2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid  317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:

人周期素依賴性激酶8(CDK8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK8 (Cyclin Depende Kinase 8) ELISA Kit  2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C26H52O3 度:98.0%

人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Methoxystypandrone  85122-21-0 中文名: 分子式:C14H12O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 虎杖; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

人周期素依賴性激酶6(CDK6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK6 (Cyclin Depende Kinase 6) ELISA Kit  2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  104239-97-6 中文名: 分子式:C19H28INO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TAK875TAK-875質(zhì)量規(guī)格:>98%,GPR40激動劑

氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)GDPNa2;5-1酸鳥苷二鈉GDP Di Salt質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR

MAP4K5 Others Human  MAP4K5 / MEKKK5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) SU11274SU-11274質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的Met抑制劑

小鼠;F9尿苷;尿嘧啶核苷Uridine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

L6細(xì)胞,大鼠成肌細(xì)胞 低轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MHCC97-L細(xì)胞 CL-0120HuH-7(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2尿嘧啶核苷,尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Uridine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
5E Others Human  5E / CD73 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 生長激素釋放因子-2GHRP-2質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]胰素樣肽-21-34),GLP-2 (1-34) (human)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長)胰素(1-29),牛,,豬Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

原代滑膜皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml胰素(19-29),牛,,豬Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B 大鼠頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL胰素樣肽Ⅰ(7-36)酰胺,Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
病毒N4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2 土壤堿性0酸酶(S-AKP/ALP)試劑盒 可見分光光度法 50/48

17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one  2398-63-2  中文名:17-亞乙二氧基--1,4-二烯-3- 分子式:C21H28O3 土壤纖維素酶(S-CL)測試盒 可見分光光度法 50/24

-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  3090-70-8 中文名:3-乙?;?span>-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3 土壤酶(S-CAT)測試盒 紫外分光光度法 50/24

17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  19041-66-8 中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3- 分子式:C26H30O3 土壤還原酶(S-)測試盒 可見分光光度法 50/24

-Androstane-3β,17β-diol  571-20-0 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2 土壤蔗糖酶(S-SC)測試盒 可見分光光度法 50/24
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR



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