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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞
起訂量 (瓶)價格
1-102350 /瓶
≥101250 /瓶
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-G63325
  • 發(fā)布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63325
用途 產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 100ul*10 100ul*50
純度 %
是否進(jìn)口
規(guī)格參數(shù):

產(chǎn)品名稱:Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞
規(guī)格 :100ul*10 100ul*50
分類:酵母感受態(tài)細(xì)胞  
用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 感受態(tài)細(xì)胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細(xì)胞,用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化,卻一個菌都沒長出來,重復(fù)了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細(xì)胞的制作不過關(guān),還是連接出了問題?哪個可能性大些?
答:應(yīng)該是連接的問題。所有連接反應(yīng)建議同時轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質(zhì)粒和片段濃度達(dá)到最小連接量的要求。
感受態(tài)細(xì)胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎?
答:如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況,是可以用來轉(zhuǎn)化的,但是由于凍存時間過長,轉(zhuǎn)化效率會有所下降,如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細(xì)胞。
操作方法:
1. DH5α感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

元鹽酸氟西汀Meta Fluoxetine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口  guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

伐地那非三水合鹽酸鹽Vardenafil  trihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,三水合物  真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20  小鼠肝細(xì)胞生長因子受體(c-MET/HGFR)試劑盒 Mouse Hepatocyte Growth Factor Receptor,C-MET/HGFR ELISA Kit

伐地那非三水合鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Vardenafil  trihydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品  MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  血小板生長因子(PGF)ELISA試劑盒 ,英文名: PGF ELISA Kit

抑氨肽酶,烏苯美司,貝他定,苯丁抑制素Bestatin,Ubenimex質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  小鼠酸性1酸酶(ACP3)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP3 ELISA Kit  MouseChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA試劑盒小鼠絨毛膜激素β(β-CG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA檢測試劑盒BovineHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 96T/48T  23599-69-1去甲異波爾定  Norisoboldine

apelin 13(AP13)試劑盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit  107316-88-1去甲澤拉木醛說明書  Demethylzeylasteral

英文名稱MouseIerleukin-3,IL-3ELISAKIT小鼠白介素3(IL-3)規(guī)格:96T/48T  2680-81-1去氫二異丁香酚品牌  Dehydrodiisoeugenol

冰凍切片中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒50  去氫茯苓酸規(guī)格  Dehydropachymic acid

Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒大鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  1630-94-4去氫鉤藤堿  corynoxeine

480-39-7喬松素  Pinocembrin   植物活性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10

480-36-4蒙花苷品牌  Buddleoside   植物核同糖1,51酸羧化/加氧酶活化酶(RUBPCase/RubiscoActivase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20

Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞480-36-4蒙花苷品牌  Buddleoside  植物根瘤原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5

480-19-3異鼠李素規(guī)格  Isorhamnetin  植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA檢測試劑盒Placalmodulin,CAMELISAKit 96T/48T

480-18-2花旗松素說明書  Taxifolin   植物鈣鎂ATP(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

聯(lián)系方式
手機:13564080845
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