橢圓釀酒酵母的質(zhì)量檢測:
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。具體計算如下:
RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,1:100稀釋至495的TE中,測得A260 = 0.21
RNA 濃度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g
取5ul用來測量以后,剩余樣品RNA為35 l,剩余RNA總量為:
35 l × 0.84 gl = 29.4 g
②純度檢測
RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度,比值范圍1.8到2.1。
2)變性瓊脂糖凝膠電泳測定
①制膠
1g瓊脂糖溶于72ml水中,冷卻至60℃,10 ml的10× MOPS電泳緩沖液和18 ml的37% 甲醛溶液(12.3 M)。
10×MOPS電泳緩沖液
濃度 成分
0.4M MOPS,pH 7.0
0.1M 乙酸鈉
0.01M EDTA
灌制凝膠板,預(yù)留加樣孔至少可以加入25 l溶液。膠凝后取下梳子,將凝膠板放入電泳槽內(nèi),加足量的1×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個毫米。
hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株
lovo/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株
HCT8/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株
BEL/L人肝癌耐奧沙利鉑細胞株
SMMC7721/L人肝癌奧沙利鉑耐藥株
A549/L人肺癌耐奧沙利鉑細胞株
HCT8/FU人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
ovo/FU人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
SMMC7721/FU人肝癌氟尿嘧啶耐藥株
PATU-8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株
SGC7901/FU人胃癌氟尿嘧啶耐藥株
A549/FU人肺癌氟尿嘧啶耐藥株
K562/DDP人白血病順鉑耐藥株
MCF7/DDP人乳腺癌順鉑耐藥株
HO-8910/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
COC1/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
A2780/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
HCT8/DDP人結(jié)腸癌順鉑耐藥株
SMMC-7721/DDP人肝癌順鉑耐藥株
Huh-7/DDP人肝癌順鉑耐藥株
SGC7901/DDP人胃癌順鉑耐藥株
BIU-87/DDP人膀胱癌順鉑耐藥株
A549/DDP人肺癌順鉑耐藥株
MCF-7/ADR人乳腺癌阿霉素耐藥細胞株
HCT116/L-OHP人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株