小鼠原代胰腺上皮細(xì)胞在培養(yǎng)體系中，需要特別關(guān)注細(xì)胞外基質(zhì)的選擇。Matrigel或膠原蛋白涂層能為上皮細(xì)胞提供近似體內(nèi)的基底膜環(huán)境，有助于維持細(xì)胞極性和三維結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)基中需添加表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF-1）等關(guān)鍵因子，這些成分不僅能促進(jìn)細(xì)胞貼壁增殖，還能維持其特有的轉(zhuǎn)運(yùn)和分泌功能。值得注意的是，原代細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)條件極為敏感，需將二氧化碳濃度嚴(yán)格控制在5%，濕度保持在95%以上，以模擬胰腺組織的微環(huán)境。

  

   為驗(yàn)證細(xì)胞純度，可進(jìn)行細(xì)胞角蛋白19（CK19）和淀粉酶的雙重免疫熒光染色——前者標(biāo)記導(dǎo)管上皮細(xì)胞，后者特異性識(shí)別腺泡細(xì)胞。功能性實(shí)驗(yàn)中，碳酸酐酶分泌檢測(cè)和囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子（CFTR）活性測(cè)定是評(píng)估導(dǎo)管細(xì)胞功能的金標(biāo)準(zhǔn)，而淀粉酶分泌實(shí)驗(yàn)則能有效反映腺泡細(xì)胞的生理狀態(tài)。

   這種培養(yǎng)體系在疾病建模方面展現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。通過添加炎癥因子如TNF-α或IL-6，可構(gòu)建急性胰腺炎模型；而采用慢性高糖刺激則能模擬糖尿病相關(guān)的胰腺病變。最新研究還嘗試將類器官培養(yǎng)技術(shù)與微流控芯片結(jié)合，構(gòu)建具有血管網(wǎng)絡(luò)的胰腺上皮模型，為研究細(xì)胞間相互作用提供更接近體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。
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