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納米小孢子菌PCR檢測試劑盒反應五要素

發(fā)表時間:2021-04-06
納米小孢子菌PCR檢測試劑盒反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

細胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 ,英文名: CagA ELISA Kit
細胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 ,英文名: CTX ELISA Kit
細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒 ,英文名: IAP ELISA Kit
細胞凋亡相關(guān)斑點樣蛋白(PYCARD)ELISA試劑盒 ,英文名: PYCARD ELISA Kit
胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA試劑盒 ,英文名: GCA ELISA Kit
特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒 ,英文名: SMAF ELISA Kit
糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: GlyCAM-1 ELISA Kit
髓性細胞核分化抗原(MNDA)ELISA試劑盒 ,英文名: MNDA ELISA Kit
髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: TREM-1 ELISA Kit
髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: MPO-ANCA IgG ELISA Kit
酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF-1 ELISA Kit
酸性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF/FGF-1 ELISA Kit
酸性成纖維細胞生長因子(aFGF)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF ELISA Kit
鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 ,英文名: ECF ELISA Kit
嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 ,英文名: ECP ELISA Kit
嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 ,英文名: Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit
視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 ,英文名: pRB ELISA Kit
神經(jīng)細胞粘著分子(NRCAM)ELISA試劑盒 ,英文名: NRCAM ELISA Kit


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